但目前关于樟树内生真菌的研究较少。本实验采用组织分离法，从樟树的不同部位分离樟树的内生真菌，并对其发酵代谢产物进行HPLC分析，从而初步判断樟树内生菌是否与樟树产生的代谢产物是否相同，也为樟树的进一步开发研究提供一些参考。 

2 材料与方法

2.1 实验材料与试剂

2.1.1 实验材料

健康樟树的茎、叶，采取来自淮阴师范学院文心路两旁。

2.1.2 培养基源'自:751`!论~文'网www.751com.cn

马铃薯葡萄糖培养基（PDA）：马铃薯200 g(去皮切块煮碎过滤)、葡萄糖20 g、琼脂16 g、蒸馏水1000 ml，pH自然值。

2.2  主要仪器设备

电子天平，赛多利斯（北京）有限公司； SW-CJ-ID型生物洁净工作台，苏州进化设备有限公司；MP-250B型霉菌培养箱，上海福马设备有限公司；HZQ-Q型全温振荡器，中国·哈尔滨市东联电子技术开发有限公司；RE-3000旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；HH-8数显恒温水浴锅，江苏金坛市亿通电子有限公司；SHB-III循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有限公司；低温冷却循环泵，郑州长城科工贸有限公司；BCD-207H型海尔冰箱；inifinte1260高效液相色谱（配备G1311A四元泵、G1315B紫外检测器、G1313A自动进样器、G1379A柱温箱、部分收集器和Chemstation工作站），美国Agilent公司。

2.3  实验方法

2.3.1  内生菌的分离、纯化及保存

采取来自学校道路两旁的健康樟树的茎和叶，分别用自来水冲洗干净并用吸水纸吸干水分，再对其表面进行消毒。消毒方法：在超净工作台中，先用75%酒精浸泡茎2.5min、叶1min，再用无菌水冲洗3次，然后用0.1%升汞分别浸泡1 min，无菌水冲洗3次。

继续在超净台中将消毒好的材料用无菌镊子挑取放入无菌培养皿中，培养皿事先放好灭好菌的吸水纸吸干水分，将其表皮剥离，用无菌手术刀纵切枝干，茎相同，并将切口对向培养基，放入其中。叶片剪去边缘，死边，再切成0.5 cm ×0.5 cm 小块，将其插入到PDA培养基中。

将上述材料经最后一次无菌水涂布在培养基表面。放入28℃恒温箱培养，如未发现材料周围长出任何菌，则证明所分离的菌株为樟树的内生菌。

 将放入好材料的PDA培养基放在28℃恒温箱中，培养3-7天。观察外植体侧面或顶端有无菌落形成，每隔12小时观察一次，如果长菌，挑取生长旺盛的菌落用平板划线的方法在培养基中纯化数次，将纯化好的菌种接种到事先做好的PDA斜面培养试管上放入4℃冰箱保存备用。