解脂耶氏酵母（Yarrowia lipolytica）是一种非传统酵母菌，发酵产物众多，之前一直作为产油菌株为人们所熟知[3]。Y. lipolytica在特定条件下（如高碳氮比的培养基中）可产生大量柠檬酸，其产量可与A. niger相媲美，因而是柠檬酸发酵领域独具潜力的A. niger替代菌株。与A. niger相比，Y. lipolytica具有原料范围广、环境敏感度低等特点，可利用很多工农业废弃物或粗原料，且该菌的发酵工艺更为安全环保，能有效缓解目前柠檬酸发酵面临的环境及社会压力。此外，该菌遗传稳定性高，有利于基因改造。Y. lipolytica作为一种公认的符合现代生产理念的柠檬酸发酵菌株，近年来受到研究者的广泛关注[2, 4]。源]自=751^`论\文"网·www.751com.cn/

目前，随着柠檬酸以及可替代资源需求的增长，人们正努力探索更为经济的发酵底物，因而柠檬酸发酵碳源的发掘成为近年来研究的主题。研究表明，柠檬酸生产菌株A. niger发酵柠檬酸的最佳碳源是蔗糖。Y. lipolytica由于自身含有脂肪酶，能够分解油脂（该菌也因此而得名），故其生产柠檬酸的最佳碳源是油脂类。上世纪60、70年代，油脂及其副产物价格较为低廉，因此酵母菌发酵油脂成为柠檬酸工业生产的备用途径。近年来随着资源紧缺现象的愈演愈烈，该途径的低成本生产优势在不断减少[1]。地沟油也称泔水油或潲水油，通常意义的地沟油是指餐饮业的烹调残油、剩菜(通称泔水) 等含油脂的废水流入下水道，经油水分离器或者隔油池分离后产生的不可再食用的油脂。随着我国的餐饮业规模日益扩大，餐饮废水中排出的废油脂日益增多，不仅造成城市环境的严重污染，而且产生了废油脂非法回收提炼回流食品市场的不法现象。地沟油含有多种有毒有害成分，具有很强的致癌性，但由于其价格低廉，地沟油回流至餐饮业的不法现象屡禁不止，给社会带来巨大危害，因此地沟油的规范化管理及合理化利用成了重要的社会问题。如今，在中国每年能够产生5亿吨的地沟油[6]，因而如何合理利用地沟油成了当务之急。

地沟油作为一种可再生的低成本原材料，其主要成分是甘油三酯[7]，在酶的作用下，甘油三酯水解成甘油和脂肪酸[8]，二者皆能在 Y. lipolytica的线粒体中通过TCA循环生成柠檬酸（图1）。在之前的研究中我们发现，Y. lipolytica发酵柠檬酸的一个重要缺点是副产物异柠檬酸产量过高，而Y. lipolytica以油脂为原料发酵柠檬酸的过程中，除了副产物异柠檬酸的累积外，还常常伴随着胞内油脂的形成（图1），这使得柠檬酸的产率受到影响。目前，人们对酵母菌利用地沟油进行柠檬酸的生产的研究仍较为欠缺，尚未见通过抑制副产物生成提高柠檬酸产率的相关报道。基于此，本研究以Y. lipolytica SWJ-1b为发酵菌株，以地沟油为生产原料，通过条件优化，降低发酵过程中的副产物——异柠檬酸及胞内油脂的合成，并探究抑制副产物生成对该菌柠檬酸的发酵产率的影响，进一步提高地沟油发酵柠檬酸产率。