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异养氨氧化细菌的筛选+文献综述(6)

时间:2017-05-12 17:07来源:毕业论文
加入显色剂20min后、2h以内,在540nm的最大吸光度波长处,用光程长10mm 的比色皿,以实验用水做参比,测量溶液吸光度 。 c) 硝酸盐测定方法 取1mL试样加入


加入显色剂20min后、2h以内,在540nm的最大吸光度波长处,用光程长10mm 的比色皿,以实验用水做参比,测量溶液吸光度 。
c)    硝酸盐测定方法
取1mL试样加入到10mL比色管中,用去离子水标定至标线,加1.0mL盐酸溶液,0.1mL 氨基磺酸溶液于比色管中,用光程长10mm石英比色皿,在 220 和 275nm 波长处,以清水加1mL盐酸作参比,测量吸光度。
2.2.3生活污水中细菌的生长情况
将2μL菌液接种到装有3mL生活污水的试管内,放入30℃、150r/min的振荡培养箱内培养,分别在24h和48h时取样,梯度稀释涂平板计数。观察两种细菌在生活污水中的生长繁殖情况。
2.2.4生长曲线的测定
(1)牛肉膏蛋白胨培养基
牛肉膏3g,蛋白胨10 g,蒸馏水1000mL,Nacl 5g,pH7.0~7.2。
灭菌条件:0.103MPa,(121℃,15min~20min)。
固体培养基加1.5%~2.0%的琼脂。
(2)异氧硝化培养基
(NH4)2SO4 0.24g,琥珀酸钠2.81g,文氏盐50mL,溶解后用蒸馏水定容至1L(固体培养基则需加入2%)。
文氏盐溶液:K2HPO4•3H2O 6.5g,MgSO4•7H2O 2.5g,NaCl 2.5g,FeSO4•7H2O 0.05g,MnSO4•H2O 0.04g,溶解后用蒸馏水定容至1L。
(3)前期准备
在含TP和E.coli的液体培养基中各取10mL于两支离心管中,离心15min,转速为4000r/min,用0.9%生理盐水冲洗后,再加5mL的生理盐水离心15 min,转速为4000 r/min,离心后将菌倒入配好的异养硝化培养基中,放入摇床中培养,温度30℃,转速为120 r/min,培养36h。
(4)OD值的检测
每隔两小时,在波长为600nm处,用空白试样为参比,测其OD值,测完后,以时间为横坐标,OD值为纵坐标,绘制曲线。
2.2.5菌株异养硝化性能的研究
a)不同影响因素下菌株的异养硝化作用
(1)不同初始pH对菌株的异养硝化作用
配置不同PH值的异养硝化培养基50 mL,使pH分别为6.0,7.0,8.0,碳源为琥珀酸钠,其他培养基成分相同(与什么相同),分别接入TP和E.coli,接种量为5%,30℃,120r/min的条件下培养,振荡培养6h,24h后测定其氨氮的降解率。 异养氨氧化细菌的筛选+文献综述(6):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_6858.html
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