2.材料与方法

2.1 供试菌株

供试菌株：本论文所用菌株为djl-10，系实验室在前期研究中从处理多菌灵农药废水的活性污泥中筛选获得。

2.2试剂

多菌灵原药纯度98%，农药厂友情赠送；二氯甲烷及其他常规试剂均为国产分析纯试剂；高效液相色谱分析用甲醇为色谱纯甲醇，购自江苏汉邦公司。

2.3 培养基

液体LB培养基（1L）：蛋白胨 10g，酵母粉 5g，NaCl 10g。

2.4 实验方法

2.4.1 供试土壤处理

取新鲜土样，在烘箱中50℃烘干，将土壤中的水分充分去除，并排除掉土壤中原住微生物的影响[7]。用筛子筛选除去石砾等颗粒杂物之后进行称重，按30mg/kg的多菌灵含量进行配制，将称好的多菌灵先用甲醇溶解，然后加入土壤样品中，使其均匀分布。待甲醇挥发干后三角瓶中密封保存备用。文献综述

2.4.2 菌株对土壤中多菌灵的降解性能研究

取12个三角瓶分成两组，每个瓶子中加入5g土壤样品，在实验组的6个瓶子中加入等量的菌，对照组则不加菌，分别在0、1、2、4、8、12时刻对一个三角瓶中的土壤样品进行全萃取来测定多菌灵的残留量，在待测样品中加入10ml二氯甲烷，并剧烈震荡1min，取1ml上清液加入2ml离心管中，放入通风橱内吹干，然后加入0.5ml甲醇（色谱纯）溶解并过滤后进行液相色谱分析[8]，流动相为100%甲醇，检测波长285nm，检测温度为30℃。

2.4.3 含水量对菌株在土壤中多菌灵降解性能的影响

在含多菌灵土壤样品中，5个三角瓶中的含水量分别为10%、15%、20%、25%、30%，于上述试验中获得的降解最适时间点进行全萃取，HPLC检测不同含水量下多菌灵的残余量。

2.4.4 温度对菌株在土壤中多菌灵降解性能的影响

在由上述实验中得出来的最适含水量为20%的土壤样品中，分别取20℃、27℃、30℃、37℃、45℃为培养温度，接入等量菌种，于最适降解时间点进行取样萃取，HPLC检测不同温度下多菌灵的残余量。

2.4.5 pH值对菌株在土壤中多菌灵降解性能的影响

根据前面实验选择含水量为20%的土壤样品，pH值为3、5、7、9、11，接入等量菌液，与37℃最适温度下进行培养，于最适降解时间点进行取样萃取，HPLC检测不同pH值时多菌灵的残余量。

2.4.6 接种量对菌株在土壤中多菌灵降解性能的影响

在含多菌灵土壤样品中，分别以0.1、0.3、0.5、0.7、1的接种量接菌，于最适降解时间点进行取样萃取，HPLC检测不同接种量下多菌灵的残余量。

2.4.7 金属离子对菌株在土壤中多菌灵降解性能的影响来!自~751论-文|网www.751com.cn

根据上述实验选择pH值为7.0、温度为37℃，含水量为20%的含多菌灵土壤样品中，分别添加FeSo4、k2So4、ZnSo4、MgSo4、MnSo4、CuSo4等浓度的金属离子，接入等量菌种，于最适降解时间点进行取样萃取，HPLC检测不同金属离子下多菌灵的残余量。

3 结果与分析

3.1 菌株降解特性

将接入菌株的含多菌灵土壤样品的三角瓶放入恒温培养箱中培养，按时间点进行取样，应用HPLC、285nm检测多菌灵的降解情况随时间的变化。