2  材料与方法

2. 1  供试样品  

大白菜、黄豆芽、青菜、菠菜皆购自淮安市菜市场

2. 2  仪器    

小型粉碎机、分光光度计、恒温水浴锅、电子天平、比色管（25ml*8）、烧杯（若干）、漏斗、容量瓶、量筒

2. 3  试剂  

氯化铵缓冲液、  硫酸锌溶液(0.42mol/L) 、  氢氧化钠溶液(20g/L) 、对氨基苯磺酸溶液

N－1－萘基乙二胺溶液(1g/L)、 显色剂、 亚硝酸钠标准溶液、 亚硝酸钠标准使用液

2.4  方法文献综述

2.4.1  样品处理 

（1）新鲜样品  称取约10.00g（青菜，大白菜，菠菜，黄豆芽）经绞碎混匀样品，置于研钵中，加入35mL水和6mL氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品pH＝8，定量转移至200mL容量瓶中再加入5mL硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2～5mL氢氧化钠，混匀。置60℃水浴中加热10min，取出后冷却至室温，加水至刻度，混匀。放置0.5h，用滤纸进行过滤，弃去初滤液20mL，收集滤液备用。

（2）隔夜样品  将上述滤液留取一半放在冰箱中，待 24小时之后，进行亚硝酸盐的含量的测定。

2.4.2  测定

（1）亚硝酸盐标准曲线的制备：吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0，2.5，5，10，15，20，25μg亚硝酸钠)，分别置于25mL带塞比色管中。于标准管中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入5.0mL显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长550nm处测吸光度，绘制标准曲线。

（2）样品测定：吸取10.0mL上述滤液于25mL带塞比色管中，于标准管中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入5.0mL显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，查标准曲线得到相应的亚硝酸盐含量，计算出实际样品中亚硝酸的含量。同时做试剂空白。

2.4.3波长的选择来.自/751论|文-网www.751com.cn/

吸取不同体积的亚硝酸钠标准使用液分别置于50ml带塞比色管中，分别加入2.00ml对氨基苯磺酸溶液，密塞混匀，放置3min后，再依次加入1.00ml盐酸萘乙二胺溶液，密

塞混匀，放置10min后定容。用1cm比色皿以蒸馏水为参比，测定吸光度。可知亚硝酸盐的最大吸收波长为538nm