色谱法分离原则是溶解在流动相的组件通过固定相，由于固定相的大小起到一定作用，又称为色层法。高效液相色谱法[5]迅速发展，高灵敏度、选择性、快速测定、分析时间短、样品处理简单、可重复的测量结果等等。该方法是测定维生素C较好的方法。

2,4-二硝基苯肼法用活性炭将样品脱氢，再与2,4-二硝基苯肼作用，然后放在冰水中加入硫酸后，用分光光度法测定，得出吸光度，再通过标准曲线和计算公式得出维生素C含量。这个方法测定总的抗坏血酸。

还有也可以用碘量法[6]测定维生素C。和2,6-二氯酚靛酚的原理有异同点，相同的是都是通过颜色的变化来决定滴定终点。当溶液呈现了蓝色，就可以记录下实验数据。电位滴定法滴定分析来解决遇到的问题，有色或浑浊的解决方案。还有原子吸收法[7]。

库仑滴定法是通过指标或电位确定端点方法。这种方法不需要我们去配置标准化的试剂的解决方案，消除了我们需要准备大量的参考资料。

2 材料与方法

2.1 2,6-二氯酚靛酚滴定法

2.1.1 实验原理

在2,6-二氯酚靛酚滴定法中，利用维生素C氧化还原反应的原理测定维生素C含量[8]。在一般情况下，在没有任何干扰的情况下，滴定步骤中测定的量多，样品中含有的维生素C的量就多，具有成正比的关系[9]。这个方法的优点很多能测定不同类型的样品。但是价格昂贵，不能直接测定样品中维生素C含量，通过测定滴定的量通过公式间接得出维生素含量，但是实验容易受到外界的干扰。而大多数水果及其研磨制品有颜色，也会影响最终的准确性。

2.1.2 实验试剂与器材 

试剂：2%草酸，2,6-二氯酚靛酚溶液，猕猴桃，橙子[10]，橘子，柠檬，番茄，黄瓜，香蕉，苹果，梨，1%草酸，标准抗坏血酸溶液（1mg/mL）

器材：研钵；吸量管（10mL）；容量瓶（50mL）；锥形瓶（50mL）；微量滴定管（5mL）；纱布；三角瓶。

2,6-二氯酚靛酚溶液：称取50mg二氯酚靛酚于200mL含有52mg碳酸氢钠的热水中,冷却后稀释至250mL。然后过滤,装于棕色瓶中,放入冰箱中保存。使用时用维生素C标准液标定其浓度。

2%草酸溶液的配制：用药物天平称取2g草酸，溶于1000mL蒸馏水中。文献综述

2.1.3 实验方法

制备含维生素C的样品提取液：称取样品5g置于研钵中，加入2%草酸30mL，进行研磨，然后待研磨均匀后用4层纱布过滤，最后用2%草酸定容至50mL，混匀，备用。

标准VC的测定：取6支50mL三角瓶，标序。在第一、二支三角瓶中都加入1mL标准抗坏血酸溶液和9mL 1%草酸溶液，在第三支三角瓶中加入10mL 1%草酸溶液，在第四支三角瓶中都加入8mL样品溶液，在第五支三角瓶中都加入8mL样品溶液，在第六只三角瓶中加入10mL 2%草酸溶液。然后用微量滴定管对每一个三角瓶进行滴定，把2,6一二氯酚靛酚溶液滴入三角瓶中，当三角瓶中的溶液变成淡玫瑰色，这时我们要特别小心，慢慢的一滴一滴的滴入，直到红色不能立即消失，持续5秒钟以上颜色不变化为终点，我们需要在表格中记录下所用2,6一二氯酚靛酚的mL数。整个滴定过程不要超过2分钟，防止放坏血酸被氧化[11]。

A（每克样品中VC）=（ ﹣V0）×T/W

 :滴定样品提取液所用的2,6-二氯酚靛酚的平均mL数；V0：滴定空白对照所用的2,6-二氯酚靛酚的平均mL数；T：1mL2,6-二氯酚靛酚相当于VC的mg数；W：称取的样品质量。

2.2 2,4-二硝基苯肼法

2.2.1 实验原理

维生素C又称抗坏血酸，生物体内的抗坏血酸主要包括还原型和脱氢型两种[12]。生物样品中的抗坏血酸以还原型为主。2,4-二硝基苯肼法用活性炭将样品脱氢，再与2,4-二硝基苯肼作用，然后放在冰水中加入硫酸后，用分光光度法测定，得出吸光度，再通过标准曲线和计算公式得出维生素C含量。这个方法测定总的抗坏血酸。 不同水果中维生素C含量的测定及其分析(3):http://www.751com.cn/shiping/lunwen_76496.html