三种色谱条件都无法检测到751椒碱信号，751椒碱在正己烷-乙腈体系中没有响应，怀疑是751椒在正己烷中溶解性差导致无法检测到信号，改用751椒碱溶解性好的甲醇和乙醇做流动相，能检测到751椒碱，但出峰时间过早，死时间出峰不能证明为样品峰，数据不可靠，尝试使用正己烷-乙醇混合体系，通过添加正己烷增加751椒碱的保留时间，加乙醇能够保证751椒碱在流动相中有好的溶解性。
4.3.2 正己烷乙醇体系
硝酸银在乙醇中微溶，所以尽量减少乙醇的添加量，为避免柱子内壁金属离子将银离子置换出来，在流动相中加入少量1moL/L硝酸。
使用异丙醇溶解正己烷定容的751椒碱标样配制混合样品，200ul天然751椒碱标样+200ul合成751椒碱标样。
图4 天然751椒碱色谱图
（U3000，银离子柱2，流动相正己烷-乙醇（7:3），室温，
流速1ml/min，进样量3ul，压力280bar）
图5 天然751椒碱色谱图
（U3000，银离子柱2，流动相正己烷-乙醇（9:1），室温，
流速1ml/min，进样量3ul，压力291bar）
图6 天然751椒碱谱图
(U3000，银离子柱2，流动相正己烷-乙醇（9：1含0.1% 1mol/l硝酸），
柱温35℃，流速1ml/min，进样量3ul)
图7 合成751椒碱谱图
(U3000，银离子柱2，流动相正己烷-乙醇（9：1，含0.1% 1mol/l硝酸），
柱温35℃，流速1ml/min，进样量3ul)
图8 混合样品谱图
(U3000，银离子柱2，流动相正己烷乙醇（92:8，含0.1% 1mol/l硝酸），
柱温35℃，流速1ml/min，进样量3ul)

按文献[36]中方法，处理银离子柱2，将1ml 0.2g/ml硝酸银注入柱子中，重新检测混合样品：
色谱条件：U3000，银离子柱2，流动相正己烷-乙醇，柱温35℃，进样量3ul，流速1ml/min，检测波长280nm
不同正己烷-乙醇配比的分析谱图见图9-图13。 调味品中合成辣椒碱的HPLC分析(5):http://www.751com.cn/shiping/lunwen_8727.html