4 1.41 2.83 5.66 11.30 22.62 45.3 90.5 181.0 362.0 -----
5 1.59 3.17 6.35 12.70 25.39 50.8 102.0 203.0 406.0 -----
6 1.78 3.56 7.13 14.30 28.50 57.0 114.0 228.0 456.0 -----
3.实验步骤
3.1.样品处理:2 μm、3 μm、5 μm有机硅球,AS5、AS4A、YSC、CS1色谱柱填料均用无水乙醇(A.R.)溶解,浓度以所需要的实验结果为准,手动摇晃3 min,备用,使用前需要超声1~2 min。人体血红细胞经过离心,用生理盐水稀释400倍,4 ℃冷藏备用。
3.2.载玻片处理:用新制铬酸溶液浸泡后,二次水洗涤数遍,烘箱80 ℃烘干,取出备用。
3.3样品涂布:2 μm、3 μm、5 μm有机硅球,AS5、AS4A、YSC、CS1色谱填料10 mg,溶于2 ml无水乙醇,混匀后超声1~2 min,用移液枪吸取十微升均匀涂布在载玻片片上,自然晾干后,将样品涂布区域用擦镜纸擦成2×2 mm区域,标记好,使得使用时能够快速的找出样品所在区域;红细胞需从冰箱直接取出后,移液枪吸取十微升滴于载玻片上,用盖玻片覆盖,不使溶液溢出,使用时需快速,否则在生理盐水挥发完后,红细胞容易变性。实验发现,红细胞的使用最好在20 min~30 min内完成,效果最佳。文献综述
3.4实验过程:
3.4.1透镜的选取
我们选取了市场上质量比较好的几种激光透镜,均有一定的放大倍数,另外,在CCD成像的时候也有一定的放大效果,所以在选择透镜的时候,需要兼顾这两方面的问题。
所以经过对刻度板对的对比,发现M9和Φ6的成像效果均不如405-G-2透镜,虽然红光透镜Φ6的成像效果也是很不错的,但是相比于405-G-2透镜还是有那么一些的差距。所以,下面讨论的实验数据均是在405-G-2透镜作为镜头的前提下获得的。
3.4.2自制显微镜拍摄样品图片
实验发现,可以调节自制显微镜的物距与像距来获得图像。即可以调节样品或者透镜,但是为了与普通光学显微镜保持一致,我们选择固定样品,LED灯组与CCD的位置,调节透镜的位置来获得较高质量的图片成像。
使用自制显微镜调节物距与像距,使得光线、样品、透镜、CCD均在同一条直线上,使用CCD的图像处理软件Image软件改变相关的检测条件,包括曝光时间、增益值(包括红增益、蓝增益、绿增益)、Gamma值、对比度等,不断的改变相关条件,来取得获取图像的最优条件,摄取各种样品图像。不同种类的样品在不同条件下的成像效果不同,所以需要大量的实验来获得最佳的成像条件。实验捕捉了2 μm、3 μm、5 μm有机硅球,AS5、AS4A、YSC、CS1色谱填料,分辨率板以及人体血红细胞的相关图像。来!自~751论-文|网www.751com.cn