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1.1.2 材料和试剂
限制性内切酶SfiI、BsaI和T4 Polynucleotide Kinase购买于NEB公司；T4连接酶、Taq酶和大肠杆菌HST04感受态购买于TaKaRa公司；细菌基因组DNA提取试剂盒、大肠杆菌TOP10感受态购买于天根生化科技有限公司；质粒提取试剂盒、胶回收试剂盒、细菌RNA提取试剂盒购买于OMEGA公司；引物由南京金斯瑞生物技术有限公司合成；其他试剂均为分析纯。芽孢杆菌转化所需试剂：SPⅠMedium(25 ml)成分为，24 ml SPⅠ-a Salts Solution、0.5 ml SPⅠ-b Salts Solution、0.25 ml (1%ν)Glucose、0.25 ml (1%ν)100×GAYE；SPⅡMedium(25 ml)成分为：24.5 ml SPⅠ Medium、0.25 ml的50 mM CaCl2、0.25 ml的250 mM MgCl2。SPⅠ-a Salts Solution(1 L)的成分为：2 g (NH4)2SO4、14 g K2HPO4·3H20、6 g KH2PO4、1 g Trisodium Citrate Dihydrate，PH7.2；SPⅠ-b Salts Solution的成分为：百分之五的MgSO4·7H2O