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摘要：本试验以‘神马’菊花CmBBX22基因为研究对象，利用构建好的pMDC43-CmBBX22 超表达载体，再以农杆菌介导的方法，侵染受体材料‘神马’的叶盘，对秋菊‘神马’进行转基因，经过抗性筛选后得到pMDC43-CmBBX22超表达的转基因菊花阳性株系，通过DNA水平PCR鉴定及qRT-PCR技术，对转基因苗进行检测，初步出鉴定出转基因阳性苗11个株系，对阳性苗扩繁炼苗成活扦插后，进行盐胁迫处理，发现CmBBX22转基因植株提高了耐盐能力。该研究为菊花的分子育种提供有用的候选基因，并为CmBBX22基因功能研究奠定了很好基础。25951
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毕业论文关键词：CmBBX22基因；‘神马’菊花；转基因
Study on the function of CmBBX22 transgenic Chrysanthemum
Abstract：This research using chrysanthemum ‘Jinba’ as the material, the constructed over expression vector pMDC43-CmBBX22 was transformed into chrysanthemum mediated by Agrobacterium tumefaciens method with leaf disc. After transgenic over-expression positive plants pMDC43-CmBBX22 were screened, which was confirmed by RT-PCR. The positive seedlings were propagated, the cuttings were treated with salt stress, which showed a strong salt tolerant ability compared with the non-transgenic plants. Taking together, CmBBX22 gene plays an important role in salt tolerance of chrysanthemum.This study provided useful candidate genes for molecular breeding of chrysanthemum and laid a good foundation for the study of CmBBX22 gene function.
Key words: CmBBX22 gene; chrysanthemum ‘Jinba’; transgenic
目 录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 3
1.2试验方法 3
1.2. 1 构建CmBBX22的超表达载体3
1.2.2转化材料的选择与预培养3
1.2.3叶盘法转化菊花3
1.2.4转基因阳性苗鉴定4
1.2.5转基因阳性苗炼苗4
1.2. 6 盐胁迫处理 4
2结果与分析4
2.1 CmBBX22转基因菊花的获得5
2.2 pMDC43-CmBBX22转‘神马’植株鉴定 5
2.3 qRT-PCR鉴定阳性苗5
2.4 qRT-PCR分析CmBBX22在盐胁迫下的表达量变化6
2.5 转基因植株的盐处理 7
3讨论7
致谢8
参考文献8
图1 菊花转基因抗性植株的获得过程5
图2 抗性株系的PCR检测5
图3 CmBBX22 在‘神马’和转基因株系中相对表达量6
图4 盐胁迫处理下CmBBX22的表达模式 6
图5 盐处理下的未转基因和转基因菊花7
CmBBX22转基因菊花功能的研究
菊花（Chrysanthemum morifolium）是菊科菊属的多年生宿根草本花卉，原产于中国，现在世界各国广泛栽培，是我国十大传统名花之一，也是世界四大切花之一，全球切花菊消费量仅次于切花月季，居第二位。菊花品种繁多，全世界有近30000种，中国有3000多种。其花型、瓣型变化极大，色、姿、韵、香四美皆备，具有很高的观赏价值和经济价值——其经济产值在世界鲜切花贸易中排列第三。因其有适应性广、花型多变、花色丰富、花期长等众多优点，故深受国内外民众喜爱。
当今切花菊单头大菊品种中，‘神马’无论在我国还是在日本都是主力品种。‘神马’品种是1987年由日本静冈县滨松市的特花园培育成功，品种权未注册保护，该品种在日本各地
很快推广种植，面广量大，替代了原有轮菊主力品种‘秀芳之力’。在我国，‘神马’约占80%左右，是第一大品种。我国近几年在掀起以出口日本市场为目标的切花菊生产热潮中, ‘神马’因其特性优良、需求量大和品种权不受保护等原因，理所当然地成为生产的首选品种。
开花时间是植物的一个重要性状，它不仅决定了植物在某一生态区域的适应性，同时也与人类生活息息相关。色彩斑斓的花朵是观赏植物的重要观赏性状之一，它不仅可以美化人们的生活环境，而且种类繁多的种子与果实能提供人类生存必需的食物[1] (赵大中等, 1999)。观赏植物在不同时间开花在某种程度上可以决定其价格，因此人们通过研究不同观赏植物成花诱导的分子机理，来实现对观赏植物的花期调控，从而宏观调控某一观赏植物的上市时间和价格。