同时,作为荧光探针,高荧光量子产率,低毒性和良好的生物相容性是对敏感的生物传感和生物成像的最关键的要求之一。例如,碳的点作为非酶传感器分别适用于血糖[6],多巴胺[7],谷胱甘肽[8],四环素[9]等。作为一种无毒和高性能的荧光显像剂用于体外[11-15,38]和体内[14,39-41]的光学成像。然而最近一些研究报道仍显示,由于CQDs的性能依旧较差,这些纳米材料在敏感的生物传感和生物成像方面还需要做更多的工作研究。
在此,我们通过一个简单和经济的合成方法,水热碳化丙氨酸和乙二胺来合成N-CQDs。其中N-CQDs的形成和通过乙二胺表面钝化是在同一个反应釜里同时完成的。同时我们也分别详细研究了N-CQDs的生物相容性和分光特性。此外,我们还提出了一种新的基于荧光猝灭后的N- CQDs传感器来检测NADH,同时我们还讨论了它的猝灭机制。
第二章 实验部分
2.1药品和材料
丙氨酸(Ala)和乙二胺,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸减少钠盐水合物(NADH),3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-2,5-二苯基溴化物(MTT),烟酰胺,D-生物素,腺苷-5'-三磷酸二钠盐水合物(ATP),谷胱甘肽,叶酸和文生素B1 / B2/ B6,DMEM培养基和胎牛血清(FBS)。所有其它化学品均为分析级的,无需进一步纯化即可使用。磷酸盐缓冲液(PBS)中的0.1M K2HPO4和KH2PO4将其pH用H3PO4或KOH溶液调节。整个实验我们都是使用的二次蒸馏水。
2.2 N-CQDs的制备
N-CQDs在一个改进过后的水热碳化体系下制备[34,35]。一个典型的一步合成,2.673克丙氨酸溶解于30.0 mL的超纯水,然后在搅拌下加入500 μL乙二胺。然后,将该溶液转移到聚四氟乙烯内衬的高压釜室(50.0 mL)中,并加热至200ºC 6小时。反应后,将反应器冷却到室温。所得的产品是深棕色和透明的,将其加入透析袋中透析(1000 MWCO) 24小时。最后,将溶液在45℃下通过旋转蒸发仪进行干燥,以获得固体粉末用于进一步研究和使用
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