1.2.2 果实可溶性糖含量的测定 可溶性糖含量的测定采用高效液相色谱(HPLC)法[13]。液相色谱仪为Waters1525系统,色谱条件如下:色谱柱为(Hi-plex Ca,7.7mm300mm,8μm,Aglient),外加保护柱(Hi-plex Ca Guard Column, 7.7 mm50mm)。柱温:85℃,参比池温度:35℃;检测器类型为Waters2414示差折光检测器;流动相:经0.45μm Sep-Pak水系微孔滤膜过滤且脱气后的超纯水(18.25MΩ•cm);进样量:7μL;流速:0.7mL•min-1。使用Breeze数据分析系统依照标准样品对样品峰面积积分,并根据可溶性糖各成分的标准曲线计算含量。标准样品购自Sigma公司(St, Louis, MO, USA),分别为蔗糖、葡萄糖、果糖和山梨醇。
1.2.3 果实有机酸含量的测定 有机酸的提取方法同可溶性糖。色谱条件如下:色谱柱为(Zorbax• SB-C18,4.6 mm250 mm, 5μm,Aglient)。柱温: 35℃,检测器:30℃;检测器类型:Waters 2487;紫外检测器,波长210nm;流动相:2%的甲醇和98%的20mmol•L-1磷酸氢二钠缓冲液(pH2.6,磷酸配制),并经0.45μm Sep-Pak水系微孔滤膜过滤;进样量:7μl;流速:0.6mL•min-1。标准样品分别为柠檬酸、苹果酸、莽草酸、草酸和奎尼酸。
1.3 统计分析
统计数据为2015和2016年测定的综合结果。应用Excel.2013和SPSS 20.0软件对数据进行统计分析。相关计算公式如下:
变异系数(CV,%) = S/F×100
遗传传递力(Ta,%) =F/MP×100
式中,S为标准差,F 为杂交后代平均表型值,MP 为亲中值。
2 结果与分析
2.1 杂交后代果实可溶性糖含量的遗传特性
‘新高’和‘红香酥’杂交后代果实中可溶性糖及各组分含量如表1所示。结果显示,两品种梨果实中可溶性糖的主要组成成分为蔗糖、山梨醇、果糖和葡萄糖。母本‘新高’的总糖、蔗糖、果糖、山梨醇含量均高于父本‘红香酥’,‘新高’葡萄糖含量低于‘红香酥’。亲本果实的可溶性糖各组分中均表现为果糖含量最高。除果糖外,‘新高’中蔗糖含量最高,山梨醇含量最低,‘红香酥’中葡萄糖含量最高,蔗糖含量最低。由图1可得‘新高’和‘红香酥’杂交后代果实中可溶性糖及其各组分含量的分布情况。试验结果显示,杂交后代总糖及其各组分含量呈连续变异,分布均接近正态分布,其中山梨醇、蔗糖含量稍有偏离,表明两品种杂交后代可溶性糖及各组分含量为多基因控制的数量性状。
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