4.2 展望 13
参考文献 13
致谢 14
猪干扰素调控因子5基因的鉴定分析
1. 前言
干扰素是人和动物细胞受到刺激时产生的一种微量的、具有高度生物学活性的糖蛋白,由英国科学家Alick Issacs和Iean Lindenmann最早于1857年利用鸡胚绒毛尿囊研究流感干扰现象时发现。由于这种具有高度生物学活性的糖蛋白能够干扰病毒的繁殖,被称之为干扰素(Interferon,IFN)[1]。干扰素是一类多功能的细胞因子,在抵抗病毒感染、抑制细胞增殖和免疫调控方面起着重要的作用[2]。近半个世纪以来,干扰素一直是病毒学、细胞学、分子生物学等相关领域的研究热点,特别是干扰素的调控机理研究。
干扰素调控因子家族(Interferon regulatory factor, IRF)最初因能结合在I型IFN的病毒诱导类增强子元件上,诱导IFN的表达而被发现并命名。正如Vaughan所说:“IRF不仅仅是IFN的调控因子” [3]。干扰素调控因子作为转录因子在干扰素的转录调控、病原体的免疫反应、细胞因子的信号转导、细胞增殖调控和造血干细胞的发育分化等方面起到非常重要的作用。
1.1 猪IRF5基因的分子结构特点
猪干扰素调控因子5基因是干扰素调控因子家族的成员之一。位于18号染色体20747732-20760161bp间的一段回文序列(ENSEMBL Gene Id: ENSSSCG00000016573),基因组序列长约12.43kb。由503个氨基酸序列组成,含有9个外显子和8个内含子(图1)。
干扰素调控因子家族成员的分子结构具有很高的同源性,IRF5的分子结构也被分成三个部分(如图2)。N端的氨基酸是DNA的结合域(DBD),形成螺旋-转角-螺旋的结构,内含特异的由10-18个氨基酸间隔的5个重复色氨酸残基[6]。通过这个DNA结合域介导IRF5基因结合到特定的DNA核心序列GAAA上,如IRF 结合元件(IRF-E, G(A)AAAG/CT/CGAAAG/CT/C)、干扰素刺激反应元件(ISRE,A/GNGAAANNGAAACT) [4.5]。
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