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摘要：目的：探究不同光质对蚂蟥生长和免疫的相关酶基因的表达。方法：通过检测幼苗期蚂蟥生长性能及体内免疫相关基因超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）基因，过氧化氢酶（catalase，CAT）基因，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）基因和生长相关基因生长激素（growth hormone，GH）基因，促生长因子（insulin-like growth factor 1，IGF-1）基因在各个时期的表达，结果表明：白光组免疫酶各基因的表达水平最高，红光组消化酶基因的表达水平最高于白光组和蓝光组。红光能够促进蚂蟥生长基因的表达而白光能够刺激免疫基因的表达。30501
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毕业论文关键词：蚂蟥；基因； 光照处理； 酶
Study on the effect of different light quality on the expression of growth and related immune enzyme gene of Whitmania pigra Whitman
Abstract：To explore the molecular effects of light quality on growth and immune regulation mechanism of leech. Through the detection of immune related genes in seedling stage of w.pigra superoxide dismutase (superoxide dismutase SOD) gene, catalase (catalase, CAT) gene, alkaline phosphatase (alkaline phosphatase AKP) gene and growth related gene growth hormone (growth hormone GH) gene, growth promoting factor (insulin-like growth factor 1, IGF-1 the expression of genes in each period), the results indicated that the expression level of each gene group white immune enzyme is the highest, the expression level of red digestive enzyme gene on top of white light group and blue light group. The red and white light can stimulate the immune gene expression can promote the expression of leech growth gene.
Key words：leech ；gene；light treatment；enzyme
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1.实验材料与方法 2
1.1实验材料 2
1.1.1实验材料 2
1.1.2主要仪器和设备 2
1.2实验方法 2
1.2.1实验设计 2
1.2.2生长性能的测定 2
1.2.3引物设计 2
1.2.4总RNA的提取 2
1.2.5 RNA的鉴定 3
1.2.6去除基因组DNA和反转录反应 3
1.2.7实时荧光定量测定GH,IGF ,SOD,CAT和AKP表达量 3
2结果与分析 3
2.1不同光质对蚂蟥各时期特定生长率的影响 3
2.2免疫相关基因表达的动态分析 4
2.2.1不同光质对蚂蟥SOD基因表达量的影响 4
2.2.2不同光质对蚂蟥CAT基因表达量的影响 4
2.2.3不同光质对蚂蟥AKP基因表达量的影响 5
2.3生长相关基因表达的动态分析 6
2.3.1不同光质对蚂蟥GH基因表达的影响 6
2.3.2不同光质对蚂蟥IGF-1基因表达的影响 6
3讨论 7
3.1 不同光质处理对蚂蟥生长相关基因表达的影响 7
3.2不同光质处理对蚂蟥免疫相关基因表达的影响 7
致谢 8
参考文献 8
不同光质对蚂蟥生长及相关免疫酶基因表达的研究
蚂蟥,全称宽体金线蛭。其涎液中含有的水蛭素、肝素、抗血栓素等,可用来治疗肿瘤、颈淋巴结核等多种疾病[19]。我国传统药用蚂蟥有3种:日本医蛭、金线蛭和茶色蛭。目前大量用于制中成药的主要为金线蛭的干燥体,人工养殖以宽体金线蛭为好(金线蛭还有个体较小的光润金线蛭、秀丽金线蛭细齿金线蛭等)。宽体金线蛭个体大、产量高,一般体重30g,最大可达50g[20]。蚂蟥之所以生长快，光是其中一个最重要的因素。对于大部分动物来说，光质是完成新陈代谢，感觉和获得能量所必须的。动物的行为受外界环境因素的影响很大，光质作为自然界中重要的生态因子，对动物行为的影响极为明显。蚂蟥由于生活习性的原因，其生长过程特别容易收到光照的影响。在不同光质下蚂蟥免疫和生长相关基因的表达有所不同，目前，光照对蚂蟥生长影响的研究仅停留在生理层面[1]，与蚂蟥生长调控相关的分子生物学研究却未见报道，因此研究光照对蚂蟥生长相关基因的表达对蚂蟥室内养殖光照模式的探索显得尤为重要。GH/IGF-1轴是水生动物生长发育调控相关的内分泌生理轴，在水生动物生长基因表达的研究中极为常见[2-3]如在斑马鱼生长基因的研究中，外源刺激能够显著提高GH基因的表达[4]不同的环境因子对水生动物的生长具有重要的影响，如李明云[5]在对大黄鱼的研究中发现，当水体盐分升高时，会显著提高大黄鱼除心脏之外的其他组织中的GH基因和IGF-1基因的表达。光因子对水生动物的生长也具有重要的调节作用，因此不同的光照条件能够刺激蚂蟥生长基因的表达并对蚂蟥的生长产生影响。本文试探究不同光质对蚂蟥GH基因和IGF-1基因表达的影响，进而为蚂蟥室内养殖的研究提供理论依据。