摘要:以MS培养基为基本培养基,探究不同浓度的植物激素对生菜再生的影响。本试验以不同生菜品种:美国大速生菜、香港生菜、法国生菜、玻璃生菜、紫色生菜为材料,培养无菌苗,以子叶为外植体,分析不同品种的生菜在不同浓度的IAA和6-BA组合下,对生菜叶片诱导出芽率的比较,寻找最适的浓度和效率最高的生菜品种,为下一步生菜遗传转化奠定基础。结果表明:各品种生菜在浓度0.2mg/ L-6-BA+1.0mg/ L IAA时子叶诱导的愈伤组织的出愈率最高,并且在此浓度下美国大速生菜在五个品种出愈率最高,高达93%。由此推断,美国大速生菜可作为生菜遗传转化的最适品种。7415
关键词:生菜;愈伤组织;再生;诱导
The establishment of the lettuce regeneration system
Abstract: To explore the effect of different plant hormones concentrations on the regeneration of different species lettuce, the research took use of MS medium as basal medium. Different aseptic seedling of lettuce varieties were cultivated, such as American Dasu, Hongkong, France, Glass, Purple, then cotyledon were applied for the explants. Various groups of auxin- IAA and cytokinins-6-BA were conducted to analyze the bud ratio of perse lettuce, and obtain the optimal concentrations of hormones and the best strains to lay foundation for the genetic transformation. The
results showed that when all varieties of lettuce were in the concentration of 0.2mg/ L-6-BA+1.0mg/ L IAA, the callus induction was the highest. And American Dasu lettuce was the highest with the rate of 93% among the five varieties in the condition. We can conclude from the above results that American Dasu was the greatest choice of genetic transformation.
Key word: Lettuce; Callus; Regeneration; Induction
目 录
摘要 1
Abstract 1
引言 2
1 材料与方法 2
1.1材料 2
1.1.1生菜种子 2
1.1.2试剂 2
1.1.3仪器设备 3
1.2方法 3
1.2.1无菌苗的培养 3
1.2.2生菜子叶愈伤组织的建立 4
2结果与分析 4
2.1不同培养基对某一特定品种(美国)生菜子叶愈伤组织诱导率的影响 4
2.2不同品种的生菜在同一浓度激素下愈伤组织的比较 5
2.3各品种生菜在不同浓度激素下的愈伤组织的比较 6
3 讨论 6
参考文献 7
致谢 9
生菜再生体系的建立
引言
生菜(Lactuca sativa L)是莴苣的一个变种,又称叶用莴苣。生菜按叶片的色泽区分为有紫生菜、绿生菜。按叶的生长状态来区分,则有半结球生菜、散叶生菜、结球生菜等。生菜育种以往都是采用常规方法,即不同形态或类型间品种杂交,然后再自交,在以后自交世代中依据各个性状进行综合性的选择。但是生菜没有明显的杂种优势,即使有一定的杂种优势,但由于花器官小,杂交技术难度大,很难应用于实际生产。随着组织培养技术在植株再生方面应用的快速发展,组织培养技术在生菜育种过程中也逐渐得到实际应用[1]。
国内已有研究工作者对影响生菜组织培养的因素作了许多探讨,结果表明,植物生长调节剂的种类、浓度及外植体的部位、年龄、基因型等对生菜的愈伤组织诱导和植株再生影响都很大[2]。但关于同时比较不同生菜品种和不同浓度激素诱导的两个观察量对生菜叶片愈伤组织诱导影响的研究报道很少,实验室中的美国,香港,法国,玻璃,紫色五个生菜品种均为常见的品种,探究哪个生菜品种在何种浓度激素刺激下诱导愈伤的出愈率最高,对后面生菜的转化实验提供了实验基础,也为生菜的组织培养及无性繁殖提供理论基础。
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