2里氏木霉及其纤维素酶
2.1纤维素酶
纤维素酶是指讲解纤维素的一组霉的总称,其不是单个霉,而是起协同作用的多组分复合酶系。纤维素酶在再生能源利用方面具有广阔的应用前景,也广泛用于农业、酿造工业、发酵工业、食品工业、以及其他领域[7]。纤维素酶是由多重水解酶组成的一个复杂酶系,自然界中能够很多真菌都能分泌纤维素酶[4]。纤维素酶特异性高,反应条件简单,降解过程中不会污染环境等,是将纤维素和半纤维素转化为葡萄糖的关键[8]。
2.1.1 纤维素酶的作用机制与制备
纤维素酶由三种酶组分构成。纤维素酶的降解机理有不同的解释,但都认为是三种组分系统作用的结果。目前,普遍接受的降解方式是协同作用模型,纤维素讲解为单糖必须依靠三种组分的协同作用。纤维素酶降解纤维素的部位优先发生在无定型区的理论已得到普遍认可。三种组分中任一组分酶的减少都会影响总体酶的效率[9]。
2.2里氏木霉论文网
里氏木霉是种好氧的丝状真菌,为多细胞真核微生物,其分泌的纤维素酶是胞外酶,经过提和分离纯化就可以得到纤维素酶制剂。由于里氏木霉产纤维素酶量高,而且稳定性好、适应性强、且可以通过物理和化学诱变获取高产菌株,便于生产和管理,因此研究和利用价值突出[5]。
3里氏木霉产纤维素酶的应用
3.1果蔬业
从纤维素没提取的纤维素酶能水解可溶性果胶和细胞壁成分,有利于果汁及蔬菜汁的提取,有效维持了果蔬的原有香味,且可促进人体对果蔬营养物质的吸收[5]。
3.2酿酒业
木霉酶制剂应用于酿酒业中具有很好的成本/性能比,是其他酶制剂所无法比拟的。近年来,纤维素酶在中国酿酒行业中的生产应用也逐步扩大,优越性突出[5]。
3.3可降解塑料业
目前,“白色污染”备受人们关注,座位解决“白色污染”问题有效途径之一的可降解塑料的研究自然很受人们的重视。近年来利用米根霉发酵生产L-乳酸,单一葡萄糖、淀粉为原料的生产成本依然较高,直接利用玉米为原料生产L-乳酸,可以利用这些丰富的营养因子,提高原料的利用率[1]。
4实验材料和方法
4.1实验菌种和药品
菌种:里氏木霉(Trichoderma reesei Rut C-30),取自淮阴师范学院生命科学学院实验室。
表1 药品
琼脂、无菌水、马铃薯 淮阴师范学院生命科学学院实验室
玉米浆、预处理的秸秆 淮安市百麦绿色生物能源有限公司
尿素、柠檬酸葡萄糖、低聚木糖、偏重亚硫酸钠、硫酸铵、乳糖、酒石酸钾钠、苯酚、 国药集团化学试剂有限公司 分析纯AR
3,5-二硝基水杨酸(DNS) 国药集团化学试剂有限公司 化学纯C
氯化钙、硫酸镁、硫酸亚铁 无锡市亚威化工有限公司 分析纯AR
氯化钴、磷酸二氢钾 中国医药(集团)上海化学试剂公司 分析纯AR
硫酸锰 上海试剂二厂 化学纯CP
氢氧化钠 南京化学试剂有限公司 分析纯AR
4.2培养基
4.2.1玉米浆种子培养基
0.2%玉米浆、0.14%硫酸铵、0.03%硫酸镁、0.1%葡萄糖、0.2%磷酸二氢钾,分装3ml在15*150mm的试管中,加塞子,120摄氏度灭菌20分钟。
4.2.2基本培养基文献综述