1.2.2 溶剂体系选择方法
分配系数测定法:一般采用TLC法结合HPLC法,先通过TLC法大致测定目标化合物的位置,然后进HPLC,根据HPLC图谱分析其上下相峰面积比值以确定目标化合物的分配系数。选择分配系数在0.5-2之间的溶剂体系。
1.3 阔叶十大功劳
1.3.1阔叶十大功劳简介
阔叶十大功劳(Mahonia bealei)是小檗科Berberidaceae十大功劳属Mahoina植物,全株可入药,具有清热解毒、止咳化痰、清肿止泻、滋阴补阳等功效[29,30],可用于治疗肺热、咳嗽、肠炎、痢疾、黄疸、目赤肿痛、胃火牙痛、 痈肿等等[31-33]。
1.3.2阔叶十大功劳的现代研究进展
现代研究进展表明,功劳木属植物具有抗菌[32]、抗肿瘤[33]、抗心律失常、消炎、降血糖等作用。根和茎可主治急性和慢性肝炎、细菌性痢疾、支气管炎等症;叶片能治疗肺结核和感冒,外用治眼结膜炎,烧烫伤等。茎皮可以提取黄连素。
2 仪器与材料
上海同田 TBE-300A 高速逆流色谱仪;Agilent 1260高效液相色谱仪;Millipore 纯水机(美国Millipore公司)。甲醇,乙醇等试剂均为分析纯。十大功劳叶于2015年9月购自贵州。
3 方法与结果来`自^751论*文-网www.751com.cn
3.1 HPLC条件
采用 Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 µm),流动相为水(A)—甲醇(B)溶液,梯度洗脱(0~5 min,20%B→30%B;5~6 min,30%B;6~28 min,30%B→48%B;28~40 min,48%B→70%B;40~42 min,70%B),流速200 µL/min,柱温30°C,检测波长254 nm,进样量10 L。
3.2 粗提物的准备
取事先制备好的十大功劳叶正丁醇萃取相溶于水中,经滤膜过滤,然后经5个洗脱梯度的D-101大孔吸附树脂洗脱:水,10%乙醇,30%乙醇,50%乙醇,70%乙醇,90%乙醇。将得到的不同浓度梯度的洗脱液旋转蒸干,分别用甲醇溶解。然后过膜稀释进HPLC,通过HPLC图谱分析发现目标化合物主要存在于30%乙醇溶液洗脱的洗脱液中