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摘要：抗体-药物偶联剂(Antibody-drug conjugates)是以单克隆抗体技术为基础发展的一种药物。由单克隆得到的抗体再经过糖基化修饰得到有着更好生物活性的抗体。本课题主要研究的就是蛋白糖链的改造和修饰。主要研究的蛋白糖链就是唾液酸糖肽（SGP），之前有过关于提取SGP的报道，不过传统方法有着严重乳化的现象且纯化方法比较繁琐，不利于大量制备。本实验中通过乙醚洗涤和丙酮-水溶液萃取避免了乳化的发生，并通过活性炭柱分离纯化从而简化了原有的方法。将SGP进行进一步的酶解处理，得到不同的蛋白糖型，再将这些蛋白糖进行合成，得到想对应的噁唑啉。28981
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毕业论文关键词：唾液酸糖肽，离子色谱，糖链库，噁唑啉
The search of transform the structure of glycan
Abstract:Antibody-drug conjugates is a kind of medicine based on the monoclonal antibody technique. After glycosylated the monoclonal antibody,the antibody may have better bioactive. Our study is mainly about the modification and reformation of the glycoprotein. Our research of glycoprotein is based on sialylglycopeptide (SGP).The method of extracting the SGP that reported before has some disadvantages .The tremendous emulsification occurred in the method probably is due to the blending of lipids, soluble proteins, organic solvent, and water. That method is hard to purify and is not suitable for the gram-scale production. We choose diethyl ether and acetone–water solution which is generates much less emulsion than the reported method .After that we use active carbon/celite (2:1) column to purify the SGP.Using enzyme to treat the SGP to get different kind of glycan,and product the oxazoline.
Key words:sialylglycopeptide (SGP),glycan,ion chromatography,oxazoline.
目录
1.1 ADC药物的研究与进展 5
1.2 单克隆抗体研究与进展 6
1.2 蛋白糖链的研究与发展 8
1.2.1糖基化修饰 9
1.2.2唾液酸糖肽的研究 11
1.3离子色谱的原理及应用 12
二、实验部分 13
2.1试剂与仪器 13
2.1.1仪器 13
2.1.2试剂 13
2.2实验步骤 14
2.2.1唾液酸糖肽的提取 14
2.2.2糖基噁唑啉的合成 15
（1）唾液酸化寡糖噁唑啉（SCT-oxa）制备 15
（2）端半乳糖寡糖噁唑啉（CT-oxa）制备 15
（3）端乙酰氨基葡萄糖寡糖噁唑啉（GN2M3-OXA）制备 16
（4）端甘露糖寡糖噁唑啉(Man3-OXA)制备 16
3．1实验结果 17
离子色谱在糖蛋白分析中的作用 17
唾液酸化寡糖噁唑啉的分析 18
端半乳糖寡糖噁唑啉的分析 19
端乙酰氨基葡萄糖寡糖噁唑啉的分析 20
端甘露糖寡糖噁唑啉(Man3-OXA)的分析 21
3．2讨论 21
致 谢 23
一、绪论
随着人们的生活条件越来越好，人们越来越专注于自身的身体健康。科学技术的发展，使现在的医疗水平得到了长足提高，从前很多的疑难杂症都有了治疗的手段。但是癌症仍然是一个影响人类健康，甚至是生命的病症，然而现在仍没有一种有效的手段或者药物能完全治愈癌症。众所周知，在社会生活中有很多因素会让人患上癌症，其中危害最大的就是外源性因素---化学致癌物。在很多方面都或多或少会接触到这些化学物质：在房屋装修中会有苯及其衍生物；在工厂的废气废水中会有砷，镍，鉻等重金属等。但致癌物最多的一种消耗品就是烟草，吸烟者吐出的烟雾中主要含有一氧化碳,氮氧化合物,烷烃,烯烃,芳烃,含氟烃,硫化氢,氨,亚硝胺等,这些有害气体对人体的肺及支气管粘膜的纤毛上皮细胞有严重的损害作用，容易造成肺癌。