- 上一篇：Rho激酶抑制剂Y-27632在雷奈酸锶促进大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的
- 下一篇：狼毒大戟甘草药对配伍挥发成分的GC-MS分析
2.3.8 免疫荧光组织化学技术检测小鼠肝脏4-HNE水平
(1) 组织切片以PBS洗3次，每次5分钟；
(2) 封闭液封闭1小时；
(3) 弃封闭液，滴加配制好的一抗[rabbit anti-4-hydroxynonenal (4-HNE) antibody 1:100]，4℃孵育过夜；
(4) PBS洗3次，每次5分钟；
(5) 组织切片在荧光标记二抗[Texas Red-conjugated anti-rabbit IgG 1:200]
稀释液中孵育1.5小时，室温,避光；文献综述
(6) PBS洗3次，每次5分钟；
(7) 滴加DAPI染液，室温孵育5-10min；
(8) 滴加抗淬灭剂
(9) 盖上盖玻片置于荧光显微镜下观察，采集图像。
(10) 用图像分析软件Image Pro-Plus 6.0进行光密度分析。
2.3.9 数据统计分析
使用SPSS软件11.5版本对各组数据进行统计分析，用单因素方差分析，以均数±标准差( x ± s) 表示，组间比较用Tukey's honestly significant difference( HSD) post hoc test进行分析，以P ＜0.05 为差异有统计学意义。
3. 结果与分析
3.1 BDE-47及曲克芦丁对小鼠体重的影响
表3-1 小鼠体重
组分 0周 12周
Control
BDE-47
BDE-47+Troxerutin
Troxerutin 33.35±0.74
33.12±0.29
33.39±0.58
33.51±0.56 38.06±1.52
39.20±1.28
38.45±2.01
37.23±1.05
处理12周后，各处理组小鼠的体重均无显著差异。
3.2 BDE-47对小鼠肝脏损伤的影响及曲克芦丁的保护作用
表3-2 小鼠肝脏系数和ALT的变化
组分 肝脏系数（g/100g） ALT( U/L)
Control
BDE-47
BDE-47+Troxerutin
Troxerutin 4.67±0.27
8.77±0.64***
5.36±0.49###
4.39±0.28### 45.96±6.87
93.08±9.33***
52.38±7.76###
40.19±6.97###
* P<0.05, *** P<0.001为与对照组相比；###为与BDE-47处理组相比P<0.001
由表3-2结果显示，BDE-47处理后，小鼠的肝脏系数和ALT活力水平与对照组相比有显著提高（P<0.05）；曲克芦丁处理使BDE-47组的肝脏系数和ALT水平明显下降，并与对照组无显著性差异；曲克芦丁组与正常组无显著性差异。来!自~751论-文|网www.751com.cn
H&E染色
箭头所示为炎症细胞，放大倍数：200×
HE染色的结果显示：BDE-47处理可导致小鼠肝脏产生明显的组织病理学改变，如肝脏实质细胞肿胀及空泡化，肝小叶中炎症细胞浸润等(图 3-1)。曲克芦丁处理可有效改善BDE-47导致的小鼠肝脏组织病理学改变，与正常对照组相比无明显差异(图3-1)。
3.3 BDE-47对小鼠氧化损伤的影响及曲克芦丁的保护作用
ROS的含量检测结果显示：BDE-47处理能够使自由基ROS的含量明显升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；曲克芦丁能够使自由基ROS含量恢复到对照组水平；曲克芦丁组与对照组含量无明显差异。