前期实验已发现，淫羊藿总黄酮提取物对鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane, CAM)血管生成具有抑制作用[14]，而目前关于ICA抗血管生成的研究未见报道。本课题组旨在前期结果的基础上，通过MTT法、流式细胞术和Transwell法体外实验观察ICA抗血管生成的能力，研究其对血管生成的影响，为进一步开发ICA的药用价值提供理论依据，也为研究中药抗肿瘤的现代化研究奠定基础。

2材料与方法

2.1材料

2.1.1细胞株

人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell, HUVEC)购自美国Sciencell公司。

2.1.2实验药品

    空白对照组：无水乙醇；

实验组：淫羊藿苷（ICA），由中国标准品鉴定所提供。

2.1.3实验试剂

胎牛血清，购自杭州四季青生物工程材料有限公司产品；

高糖DMEM培养液、0.25%胰酶，购自Gibco公司；

Transwell培养小室，购自美国Corning 公司产品；

二甲基亚砜( DMSO)、碘化丙锭(propidium iodide, PI)、吖啶橙(AO)、伊红、苏木精、纤粘连蛋白(FN) 、Eukitt胶，购自美国Sigma公司；

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒，购自凯基生物材料有限公司；

丙酮（分析纯），生产厂家：中国杭州化学试剂有限公司；

甲醛（分析纯），生产厂家：中国浙江衢州巨化试剂有限公司；

无水乙醇（分析纯），生产厂家：安徽安特生物化学有限公司；

75%酒精（自配）。

2.1.4实验仪器

超级洁净工作台，购自博讯实业有限公司医疗设备厂；

T1-SM120型倒置显微镜，购自Nikon公司；

高压灭菌器，购自美国Zealway公司；

EPICS XL流式细胞仪，购自美国Coulter 公司；

荧光显微镜，购自德国Leica公司；

酶联免疫检测仪，购自Biorad公司；