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G3放线菌代谢产物抑制肿瘤细胞活性的初步研究(4)

时间:2021-07-24 15:52来源:毕业论文
AHL-2001-P 重庆颐洋企业发展有限公司 冷藏柜 Haier SC276 青岛海尔集团 紫外可见分光光度计 UV-7504 上海欣茂仪器有限公司 倒置相差显微镜 CKX41 日本OLYMPUS公司

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酶标仪 Flexstation3 美国Alpha Innotech公司

2.1.5培养基配制

(1)大豆玉米培养基(1000 mL)

黄豆粉 30 g 葡萄糖 20 g

玉米粉 30 g CaCO3 3 g 

NaNO3 10 g FeSO4 0.3 g

K2HPO4.3H2O 0.2 g MgSO4.7H2O 0.3 g

补全蒸馏水定容至1 L 调节pH约7.2

方法:称取各配方量,加蒸馏水600 mL混匀,防止影响调pH。补全蒸馏水定容至1 L,调节pH约等于7.2,分别装入10只500 mL三角瓶中,每瓶100 mL培养基。封口进行灭菌处理20 min,灭菌温度为121 ℃。

(2)ISPII固体培养基(1000 mL)

麦芽浸粉 10 g 酵母浸膏 4 g

葡萄糖 4 g 琼脂20 g

补全蒸馏水定容至1 L 调节pH约为7.2

方法:称取培养基各配方量,蒸馏水混匀,加入琼脂条,放入微波炉加热至琼脂融化,调节pH约等于7.2,倒入500 mL容积的三角瓶中,封口进行灭菌处理20 min,灭菌温度为121 ℃。待冷却至50-60 ℃后在无菌操作台中倒平板和制作斜面培养基。文献综述

(3)ISPII液体培养基(1000 mL)

麦芽浸粉 10 g 葡萄糖 4 g

酵母浸膏 4 g

蒸馏水补到1 L 调节pH约7.2

方法:称取各配方量,加蒸馏水搅拌,补到体积1 L,调pH约7.2。倒入500 mL容积的三角瓶中,封口并标记,灭菌处理20 min,121 ℃。

(4)高氏一号合成培养基(1000 mL)

可溶性淀粉 20 g KNO3 1 g

NaCl 0.5 g FeSO4.7H2O 0.01 g

K2HPO4.3H2O 0.5 g MgSO4.7H2O 0.5 g

加蒸馏水补到1000 mL 调节为pH 7.2至7.4

方法:称取各配方量,加蒸馏水搅拌,补到体积1 L,调pH约7.2。倒入500 mL三角瓶中,封口进行灭菌20 min,灭菌温度为121 ℃。 

(5)PD液体培养基(1000 mL)

马铃薯小块 200 g 蔗糖20 g

加蒸馏水体积补到1 L 调节pH 7.2至7.4

方法:切洁净马铃薯小块 200 g煮沸,煮透软后用干净的纱布过滤。多次操作后加入蔗糖20 g,加蒸馏水到1 L,调pH约7.2。倒入500 mL容积的三角瓶中,封口进行灭菌处理,121 ℃灭菌20 min。来!自~751论-文|网www.751com.cn

(6)DMEM培养基(1000 mL)

DMEM粉末13.50 g NaHCO3 3.70 g

两性霉素2 mg 丙酮酸钠0.11 g

抗生素溶液400 μL

ddH2O定容至1 L 调节pH 7.4

(7)PBS溶液 (1000 mL)

KH2PO4 0.24 g Na2HPO4 1.45 g 

KCl 0.20 g G3放线菌代谢产物抑制肿瘤细胞活性的初步研究(4):http://www.751com.cn/yixue/lunwen_78895.html

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