角蛋白及角蛋白酶在肥料、医药、化妆品等很多领域都有非常高的利用价值和广阔的发展前景。土壤中含有多种能使其降解的菌株,例如从长期堆积羽毛废弃物的土壤及羽毛处理场的污泥中分离到能降解羽毛角蛋白质的嗜麦芽窄食单胞菌属(Stenotrophomonas)、微杆菌属(Microbacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)4种微生物[10]。从禽肉加工厂的污泥中分离到174株能在牛奶琼脂平板产透明圈微生物菌株,其中42株具有分解羽毛的能力,从中筛选出13株具有较强羽毛降解能力的菌株,均能在48 h内将羽毛完全分解[10-12]。采用以羽毛粉为唯一碳源和氮源的培养基,从自然界中分离到一株能够高效降解羽毛角蛋白的细菌,经过形态学观察,生理生化实验和16SrRNA基因鉴定,初步确定该菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)[13]。本文主要研究了土壤中可降解羽毛菌株的筛选,并对这种菌株进行了初步的鉴定和分析,为菌株的实际生产应用奠定了初步的研究基础。
2 实验材料与步骤
2.1 实验材料
2.1.1 土壤
从实验室附近随机取样得到新鲜土壤样品500g左右,使用无菌的塑料袋封袋,保存于4℃冰箱。
2.1.2 羽毛
从市场收集羽毛废弃物,洗净,再用蒸馏水洗多次,烘干备用。
2.1.3 试剂
名称 生产厂家
牛肉膏 国药集团化学试剂有限公司
蛋白胨 国药集团化学试剂有限公司
琼脂粉 SCRC国药集团化学试剂有限公司
K2HPO4•3H2O 南京化学试剂厂
氯化镁 国药集团化学试剂有限公司
硫酸铵 宜兴市试剂二厂
硫酸镁 国药集团化学试剂有限公司
酵母提取膏 国药集团化学试剂有限公司
无水碳酸钠 宜兴市亚盛化工厂
氢氧化钠 中国蚌埠化学试剂厂(安徽)
硫酸铜 宜兴市第二化学试剂
NaCl 国药集团化学试剂有限公司
浓HCl 南京化学试剂有限公司
CuSO4 宜兴市第二化学试剂厂
KCl 丹徒第一化工厂论文网
NH4NO3 徐州市试剂二厂
KNO3 广东汕头市西陇化工厂
浓H2SO4 南京化学试剂有限公司
NaNO2 连云港市化学试剂厂
H2O2 上海桃浦化工厂
结晶紫 中国医药(集团)上海化学试剂公司
乙醇 国药集团化学试剂有限公司
草酸铵 上海化学试剂总厂所属上海试剂一厂
碘 上海化学试剂总厂所属上海试剂二厂
名称 生产厂家
碘化钾 中国医药(集团)上海化学试剂公司
香柏油 上海标本模型厂
葡萄糖 国药集团化学试剂有限公司 一株降解羽毛菌株的筛选与鉴定(2):http://www.751com.cn/shengwu/lunwen_77275.html