蜂蜜中成分比较多，不但含有多种糖，而且含有有机酸、酶以及来源于蜜蜂采集的固体颗粒物，如植物花粉等。蜂蜜本身并不含有植物DNA，但因为蜂蜜中经常掺入一定量的植物花粉，因此也有可能带有转基因成分[7]。蜂蜜因含有蜜源植物花粉而成为与转基因植物相关的特殊的动物源产品。蜂蜜中的转基因花粉主要是来自于蜂群采集并储存在蜂房的花粉。另外一些蜂农为了获得具有不同的香型和风的蜂蜜，人为地添加花粉。如果这些花粉来自于转基因作物，那么蜂蜜中就有可能含有转基因成分[8]。因此，本实验为了检测蜂蜜中的转基因成分，首先需要从油菜蜜中提取出油菜花粉DNA；然后对蜂蜜中油菜花粉的DNA进行实时荧光定量PCR检测，以确认蜂蜜中是否混入转基因油菜花粉；最后利用bar蛋白检测试纸条分别对不破坏油菜花粉和除去油菜花粉的蜂蜜进行检测，观察并确认蜂蜜中是否表达出外源bar蛋白。

为了准确地评价转基因食品的安全性，对转基因食品进行标识管理，建立简单、快速、准确的方法检测其含有的转基因成分，是当前研究的热点问题。目前，转基因产品的检测方法主要有两种：一种是直接对外源基因进行检测，最常用的是以核酸为基础的PCR技术。近年来，具备PCR和杂交探针两者优点的实时荧光定量PCR技术发展非常迅速，检测灵敏度比常规PCR技术高100倍左右[9,10]。通过分析PCR过程中荧光信号的实时变化，就可以得到样品中DNA模板含量的定量结果。运用实时荧光定量PCR方法检测外源基因，克服了传统的PCR方法一直面临的几个问题：一是不能准确定量；二是容易发生交叉污染，出现假阳性；三是普通PCR都是分析的最终产物。但是在大多情况下，人们感兴趣的是没有经过PCR 放大前的初始模板量，荧光定量 PCR 技术在这种情况下就应时而生了[11]。荧光定量PCR技术自从产生以来，经过不断地发展和完善，到目前为止技术水平已经非常成熟。这项技术不但实现了对DNA模板的定量，而且具有实时性好、特异性好、可靠性好、灵敏度好、自动化水平高等优点。其标记方法也由起初的染料法发展到特异性更好的探针法。现在，实时荧光定量PCR检测技术已经普遍地运用到食品、生物、医学、农业等多个学科领域[12]。对于转基因成分的检测，除了核酸检测外，还可通过另一种方法进行检测，即对转基因产物中的外源蛋白进行检测，如ELISA法、蛋白质印迹法和试纸条法等[13]。在本实验中采用了bar蛋白检测试纸条法，该方法的主要原理是利用抗原抗体特异性反应，具有特异性强、操作快捷简便、灵敏度高等优点。

2 材料与方法

2.1 试验材料

花粉供体材料：选用我国自主培育的冬性甘蓝型转bar基因抗草胺膦油菜“Z7B10”(中国农科院油料所培育，2009年通过农业部环境释放试验)。

花粉受体材料：选用与“Z7B10”花期一致、异交结实率高的同类型普通油菜“中双10号”(中国农科院油料所选育，2005年通过国家品种审定)。

蜜蜂：选用我国特有的中华蜜蜂(Apis cerana cerana Fabricius)。

2.2 试验地点

以我国冬油菜主要产区江苏淮安为试验地点。试验在淮阴师范学院“生物科技园”油菜隔离区进行(位于校园内)，试验区四周建有围墙且墙外3公里内为城市居民区和商业区，能充分满足本研究所需要的环境隔离条件。