DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司

VS-840-1洁净工作台 上海博讯实业有限公司医疗设备厂

BSA224S电子天平 赛多利斯科学仪器（北京）有限公司

1.4培养基

LB培养基：蛋白胨10 g，酵母粉5 g，氯化钠10 g，水1000 mL，琼脂15 g。配好的培养基121℃灭菌20 min备用。

1.5试液

（1）3,5-二硝基水杨酸试剂：称取0.63 g 3,5-二硝基水杨酸并量取26.2 mL 2moL/L NaOH加到酒石酸钾纳的热溶液中（18.2 g酒石酸钾纳溶于50 mL水中），再加0.5 g结晶酚和0.5 g亚硫酸氢钠溶于其中，搅拌溶解后定容到100 mL贮于棕色瓶中。

（2 ）1 mg/mL葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖10 mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至10 mL，即含葡萄糖为1.0 mg/mL。

（3）5C的丙烯酰胺储存液10 mL:用电子分析天平称取4.7 g的丙烯酰胺和0.25 g的甲叉双丙烯酰胺，放置于玻璃瓶中，用重蒸水溶解，配成10 mL 49.5%的储存液。

（4）10%的APS溶液：用电子分析天平称取0.06 g的过硫酸铵，用600 mL的蒸馏水溶解混匀。

（5）正极缓冲液：4.846 g Tris溶于16 mL去离子水中，用1.0M HCL调至pH8.9，定容至200 mL。

（6）负极缓冲液：将2.422 g Tris，3.5832 g Tricine及0.2 g SDS溶于16 mL去离子水中，加水至终体积为200 mL。

（7）尿素胶：在电子分析天平中称取2 g的尿素放在10 mL的小烧杯中，用移液枪按顺序抽取2 mL 的5C储存液，1.5 mL的 pH8.8的缓冲液，60 μL的10%SDS，800 μL的蒸馏水，溶解。继续加入20 μL的10%的APS以及2 μL的TEMED来!自~751论-文|网www.751com.cn

（8）浓缩胶：用移液枪按顺序吸取水1.4 mL，30%的丙烯酰胺0.33 mL，pH为6.8的Tris 0.25 mL，10%的SDS 0.02 mL,10%的APS 0.02 mL以及TEMED 2 μL于小烧杯中，

（9）染色液  称取0.2 g的R250，加入84 mL和20 mL的冰醋酸，并用去离子水定容至200 mL，混匀，过滤备用。

（10）脱色液 用量筒量取70 mL的95%的乙醇，10 mL的冰醋酸以及120 mL的去离子水于试剂瓶中，混匀。