(3)下刀进行切片时要在材料的切面上滴上去离子水，，涂抹均匀，保证实验持材料湿润，然后使刀片与材料切口基本上保持平行，再用右手的臂力（不要用手的腕力）向自身方向拉切。

(4)连续地切下数片后，将刀片放在培养皿的水中稍一晃动，将粘在刀片上的材料薄片抖进去离子水中，材料薄片随即漂浮在水面上。

(5)当所切除的材料薄片达到一定数量后，便可以在培养皿内挑选透明的材料薄片用于观察。

(6)适于观察的切片应该具有薄且比较透明、组织结构完整的特点，否则要重新进行切片，直至符合此标准。

(7)使用镊子挑选出适于观察的薄片放在载玻片上，加滴去离子水后加盖盖玻片，张贴部位标签，便于编号、记录结果。

(8)置于显微镜下观察并拍照。

(9)切片方法分为横切与纵切，实验操作中对上叶片下叶片、叶柄、茎、等部位进行多次采样切片。

2.3花青素测定方法

2.3.1 甘薯花青素浓度测定步骤

(1)提取花青素【10】需要提前配制0.1M柠檬酸-0.2M磷酸氢二钠缓冲液，配制总量为200mL，具体配比为磷酸氢二钠固体称取3.5814g，柠檬酸固体称取3.8428g。

(2)选取新鲜实验部位，清洗晾干后，准确称取1.000g，加入少量缓冲液手工研磨，然后放入50ml离心管内，再加入适量的0.1M柠檬酸-0.2M磷酸氢二钠缓冲液，最后定容至50ml。

(3)上下颠倒数次，振荡混匀后进行离心，离心机的设置为4,000 rpm 10min。来!自~751论-文|网www.751com.cn

(4)将实验样品取出后，在室温下静置30分钟，之后用分光光度计测定待测材料样品的吸光值，波长为530，详细记录每个实验样品的吸光度。。

(5)把测得的样品吸光度值，通过计算公式换算成花青苷质量含量，吸光值测量和换算计算。重复三次取平均值。

2.3.2甘薯花青素含量的计算方法

(1)以 Nano Drop ND100 UV-VIS 分光光度计测得的吸光度值计算公式[7]：

C=1/958×V/100×1/M×ABS×10×100000；

(2)以 Heλios 测得的吸光度值计算公式：C=1/958×V/100×1/M×ABS×100000。注：958：ABS 转换为质量体积比的经验系数；C：花青素含量，单位为 mg/100g (鲜薯)；V：定容体积(ml)；M：样品质量(g)；ABS：分光光度计的吸光度值；100000：单位转换系数。