荧光分析有着其他方法无可比拟的优点,设备简单便捷,强大的选择性,低廉的成本,较高的灵敏度,使得其一问世就比其他方法来得更快,更广。
1.4紫外光谱法介绍
1.4.1紫外光谱法的基本介绍
紫外可见吸收光谱法是一种用来定性和定量测量的方法,经过技术的发展,如今广泛应用在有机和无机物上。这种方法是利用某些物质的分子能够吸收10~800 nm光谱区的辐射来进行分析定性测定的[22]。因为这种方法操作简单,灵敏,既省时又准确,得到了科学工作者的广泛应用。
1.4.2紫外可见吸收光谱仪介绍
紫外可见吸收光谱仪,主要组成部分包括光源、单色器、样品池(吸光池)、检测器、记录装置组成[23]。因为紫外可见光波长范围为200~800 nm,因此需要两个不同且分立的光源,即氘灯和钨灯的其波长分别为185~395 nm和 350~800 nm。大部分紫外光谱仪都可以通过操作一个动镜来顺利完成光源之间的平滑切换。这种方法使得光源可以顺利平滑地扫描全光谱范围。紫外光谱仪工作流程大致分为以下几点。首先要把光源发出的光进一步调制成光束,这个步骤是通过光孔操作来完成的,接着光束进入了单色器;单色器的结构包括色散棱镜或者衍射光栅,它的存在使得光束在经过单色器后发生了变化,使单色光变成了多组而且具有不同的波长。而此时光栅的作用显现出来。光栅在转动中可以利用单色光所具有的不同波长,将其一一送进样品池。最后进入检测器(光电管或者光电倍增管组成)。最后通过电路放大,得到光谱图。 文献综述
图1双光束分光光度计的原理图
1.5红外光谱法介绍
红外光谱法全称为“红外分光光度分析法”[24]。用来检测和分析分子结构的一种方法[25]。根据不同待测物的不同会有选择性的吸收红外光区的电磁辐射来进行结构分析。红外光谱法可以对各种吸收红外光的化合物进行定量和定性分析。物质的组成靠的不断振动的状态的原子,这些处在振动状态的原子振动频率大致与红外光的振动频率相同[26]。当有机物被红外光照射时,分子因为吸收红外光而会发生振动引起能级跃迁,化学键和官能团吸收频率因类而异,有机物分子遇到与其转动频率相同的红外光谱时才会将其吸收,所得到有机物的吸收光谱通常被称为红外吸收光谱,简称红外光谱“IR”。对红外光谱特征吸收峰进行分析,可对物质进行细微的定性分析[27]。各个物质的基本含量也将会通过红外吸收光谱反映出来,这时可根据特征峰位置、峰的吸收强度进行定量及定性分析。红外光谱法拥有极强的特征性、快速的测定能力、对试样的保护、以及操作简便、可以应对不同状态的试样、不俗的灵敏度等一系列优点,但是在定量分析方面存在较大的误差。
1.6课题的目的和意义
近年来,由于半导体量子点不同一般材料,它具有独特的量子效应,成为一种与其他学科交叉的研究趋势,量子点作为一种新型的纳米荧光材料,逐渐成为生物分析领域的一种重要的工具,在生物标记、生物传感、生物成像、免疫分析等方面,都取得了多项重要的成果,显示出了巨大的应用价值以及开发潜力。研究表明无机壳层可以致密的对量子点进行修饰,减少纳米晶体的表面缺陷。另外,对量子点表面进行修饰不仅可提高量子点的荧光强度和荧光稳定性,还可使其毒性大大降低。基于此,本论文以二氧化硅为来源对羧基水溶性CdSe/ZnS QDs进行修饰,合成出CdSe/ZnS@ZnS-SiO2 QDs。采用荧光光谱法和紫外光谱法研究了量子点和Cyt c之间的相互作用。