3.4.2 料液比对ALDH提取效果的影响 14
3.4.3 提取ALDH方法的选择对其的影响 14
3.4.4 超声破碎时间对乙醛脱氢酶的影响 15
结论 17
致谢 18
参考文献 19
1 绪论
1.1 乙醛脱氢酶的概述
乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase,ALDH)是一系类氧化各式各样脂肪族醛、芳香族醛为相应酸的酶,广泛存在于细菌、植物、动物和昆虫,在辅酶I存在的条件下,它能催化某些醛和酮的脱氢反应。在人体内及其很多动物体内,线粒体内的乙醛脱氢酶能转化生物体有害的醛类,因此在细胞解毒研究中,乙醛脱氢酶备受人们的关注。[1]乙醇进入人体内后,主要是在肝脏内进行代谢。乙醇代谢主要靠两种酶,一种是乙醇脱氢酶(ADH),另一种是乙醛脱氢酶(ALDH)。乙醇脱氢酶(ADH)是一种含锌酶类,它能够以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸为辅酶,催化伯醇和醛之间的可逆反应。乙醇脱氢酶的主要作用是将乙醇转化为乙醛,在酒精代谢中起主要作用。已知人类的乙醛脱氢酶由三个基因所编码:ALDH1A1、ALDH2及21世纪初发现的ALDH1B1(亦称ALDH5)。乙醛是一种毒性很强的物质,可以共价结合微粒体蛋白形成乙醛蛋白络合物,抑制干细胞合成蛋白的排出,最终造成人体酒精性肝病的发生。除此之外,乙醛还能通过黄嘌呤氧化酶转变成超氧化合物,使膜脂质过氧化生成丙二醛和壬烯,它们进一步促进了干细胞释放因子,最终破坏细胞膜。当人体内乙醛含量积累过多时,会产生脸红、呕吐等现象,严重时会导致休克。因此,乙醛脱氢酶分解乙醛受到了人们的重视,希望通过研究乙醛脱氢酶来研发出解酒的制品,加快体内乙醛的代谢。
1.2 乙醛脱氢酶在医学上的应用
1.2.1 乙醛脱氢酶与肿瘤
长期的大量摄入乙醇会增加上消化道癌(口腔、咽、喉和食道)、胃癌以及直肠癌的发病率[2]。研究表明乙醛有直接的诱变和致癌性。乙醛导致DNA复制异常和削弱修复作用的一个机制就是形成稳定的DNA络合物。有很多流行病学研究已经证实, 携带ALDH 2* 2等位基因的亚洲人因酗酒引发消化道癌症的几率明显较大: 胃癌、结肠癌、肺癌为3~ 10 倍; 咽癌、食道癌为11~ 15倍; 而食道癌、咽癌和肺癌同时发病的几率增加了50倍。
乙醛脱氢酶分布于不同的组织中,具有高度氧化活性,在氧化视黄醇为视黄酸的过程中参与基因的表达和组织分化,ALHD1和ALDH1A1为其中的亚型,其高表达在肿瘤组织中作为肿瘤干细胞的标记。
1.2.2 乙醛脱氢酶与心血管疾病
乙醛脱氢酶2(ALDH2)是线粒体内一种重要的醛类氧化酶,在心血管疾病的发生、发展过程中发挥重要作用。ALDH2野生型能够抑制心肌细胞凋亡发挥心肌保护作用,是心力衰竭和心肌病的保护因子。ALDH2还是体内重要的氧化应激分子,ALDH2野生型能够减少体内的氧化应激,减缓动脉粥样硬化进展;增加斑块的稳定性,减少心肌梗死。ALDH2缺失型不是通过调节饮酒量,而是通过增加体内的氧化应激加重高血压,成为高血压的危险因素。ALDH2是不依赖调节饮酒量的独立的心血管作用因素。
1.2.3 乙醛脱氢酶与神经系统
乙醛脱氢酶2(ALDH2)是存在于线粒体内的广泛参与体内醛类物质氧化的一种醛类氧化酶。ALDH2是一种硝酸还原酶,ALDH2野生型可能通过此途径产生更多的一氧化氮使血管内皮发生损伤,从而增加脑梗死的发生率。ALDH2突变型患者阿尔茨海默病的发病率更高。ALDH2的失活导致乙醛的蓄积与乙醇性多发性神经病变有关。ALDH2可减轻神经细胞的氧化应激损伤,对神经保护的研究具有重要的意义。因此,研究ALDH2的基因多态性及激活ALDH2将为神经退行性变疾病的治疗提供新的思路。
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