在国内外有许多关于重金属对鱼类及水生生物的毒性试验研究的报道,尤其在重金属对鱼类毒性的试验研究方面,实验材料多见于海水类和淡水类的多种鱼等,但未见重金属汞对泥鳅的毒性试验中检测汞对泥鳅的谷丙转氨酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响。【4】本文就汞对泥鳅的安全浓度和半致死浓度下谷丙转氨酶和乙酰胆碱酯酶的活性影响,体现汞对泥鳅的毒害作用。
1 材料与方法
1.1 主要试剂
氯化汞(国产分析纯),98%的乙醇,冰醋酸(国产分析纯),乙酰胆碱酯酶测定试剂盒(南京建成生物工程研究所),谷丙转氨酶测定的试剂盒(南京建成生物工程研究所),专用考马斯亮蓝蛋白测定的试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.2 实验动物
实验取大小适中,活泼健康的泥鳅,至于塑料水箱中饲养,养殖用水为充分爆气两天的自来水
1.3 主要仪器
UV-7504紫外可见光分光光度计 上海辛茂仪器有限公司
SK-1快速混匀器 金坛市富华仪器有限公司
Anke TGL-16G-A 上海安科学仪器厂飞科牌离心机
KA-1000 上海安科学仪器厂飞科牌离心机
1.4 方法
1.4.1确定汞对泥鳅的半致死浓度和安全浓度
a.预先配制成HgCl2的母液,然后根据具体试验需要质量浓度进行稀释。【5】
b.采用净水生物测试方法,,在试验期间采取停止喂食的方法,以防止对实验造成其他方面的影响。【6】从有汞对鱼类的影响文献中查到汞对其他鱼类的96h半致死浓度是2.06mg/L. 【7】所以先做预实验,设置了2.0mg/L、1.75mg/L、1.50mg/L、1.25mg/L、1.00mg/L、五个浓度梯度值,在每个质量浓度的塑料容器内放入10条泥鳅,其结果是不到48h泥鳅全部死亡。第二次设置的浓度梯度是0.4mg/L、0.35mg/L、0.30mg/L、0.25mg/L、0.20mg/L,每一容器内仍然放油10条泥鳅,在经历了96h后,0.20mg/L浓度的汞溶液中泥鳅全部都活,0.25mg/L、0.30mg/L浓度的汞溶液中,一半的泥鳅成活。由此可以推出汞对泥鳅的96h半致死浓度在0.20~0.30mg/L之间。在此基础上第三次设置的751个浓度梯度为0.30mg/L、0.28mg/L、0.26mg/L、0.24mg/L、0.22mg/L、0.20mg/L.在96h后得出的是0.26mg/L处泥鳅成活一半,0.24mg/L浓度的泥鳅全活,则认为汞对泥鳅的96h半致死浓度为0.26mg/L.
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