本实验通过对涝害胁迫条件下的玉米幼苗进行亚精胺的喷施,研究亚精胺对涝害下玉米幼苗的生长是否具有影响。为玉米防涝提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1供试材料
玉米农大95
1.1.2试剂
(1)0.2mol/L pH=7.8磷酸缓冲液配置100mL:称取3.121gNaH2PO4和7.164gNa2HPO4各加入蒸馏水分别定容成100mL,取Na2HPO4(磷酸氢二钠溶液)91.5mL,从NaH2PO4(磷酸二氢钠溶液)8.5mL,混匀
(2)100mmol/L磷酸缓冲液pH=6.0配置1000mL:称取15.605gNaH2PO4和35.82gNa2HPO4各加入蒸馏水分别定容成1000mL,取Na2HPO4(磷酸氢二钠溶液)123mL和NaH2PO4(磷酸二氢钠溶液)877mL,混匀
(3)75%乙醇
(4)0.1mol/L H2O25mL(称取30%H2O20.0567g溶于5mL的蒸馏水中),30%H2O2
(5)邻甲氧基苯酚(C7H8O2)
(6)石英砂
(7)0.5%硫代巴比妥酸溶液(称0.5克TBA用20%三氯乙酸(TCA)溶液溶解并定容到100毫升)
(8)酶提取液
(9)亚硝酸钠溶液:称10mg亚硝酸钠放入烧杯,再加入100毫升水。
(10)1%对氨基苯磺酸(C6H7NO3S);
(11)0.1mol/L磷酸缓冲液,pH7.0
(12)a-萘胺溶液;取10mg a-萘胺放入烧杯中,用2毫升左右的95%酒精溶解,然后加水到200毫升,就制成了50ug/ml的溶液。另取150ml50ug/ml溶液再加水150ml成25ug/ml的a-萘胺溶液。
(13)双蒸水
(14)亚精胺溶液
1.1.3设备
UV-7504紫外/可见分光光度计;水浴锅;刻度滴管;刻度吸管;玻璃研钵;吸水纸;电子分析天平;微量移液器(1000μl, 100μl);电导仪;普通冰箱(-20℃,海尔);100mL容量瓶;台式冷冻离心机;25mL容量瓶;移液管;喷壶;生化培养箱(LRH-250-A)
1.1.4玉米幼苗的培养和处理
(1)将玉米种子在30℃下浸种、催芽,选取生长良好等的种子种在盛有土壤的塑料钵内,每钵3-6颗种子。
(2)在室温下培养。当玉米幼苗生长到二叶一心时(二叶期),作如下处理:将玉米幼苗分为两组并转移至盛水的盆里进行淹水处理。组①,每天早晨8点用蒸馏水喷洒玉米幼苗叶片,连续喷施2d;组②每天早晨8点用0.4mmol/L 亚精胺喷洒玉米幼苗叶片,连续喷洒2d。
(3)在人工气候箱中:光的周期为24h,白天夜晚各12h。温度为白天20℃,夜晚10℃。光的照强度为80μmol/m2/s,相对湿度80%。
(4)取玉米的叶片测定各种指标,每一钵取为一个重复样重复2次,对每个指标重复测定2次。
1.2测定项目与方法
1.2.1电导率的测定
具体步骤;
1、称取0,1g叶片
2、剪成碎片,可叠在一起剪,保证所剪叶片一致,可以大一点
3、在蒸馏水中浸泡45分钟,测玉米根的电导率
注意:整个过程中,叶片接触仪器用具必须非常干净(所有的器皿要清洗干净),不能与叶片有直接接触,以避免污染;电极及时清洗
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