菜单
(4)加入200μL无 水乙 醇,充分颠倒混匀,再简短离心,去除管壁内侧的水珠。
注意:在加入无 水乙 醇后,溶液可能会出现絮状沉 淀,但并不影响实验。
(5)将溶液以及可能出现的絮状沉淀一起转移入放入收集管中的吸附柱CB3中,12000 rpm离心30 s,弃滤液,再将吸附柱CB3放回收集管中。
(6)加入500μL缓冲液GD(使用前先按照说明要求加入无水乙醇),12000 rpm离心30 s,弃滤液,再将吸附柱CB3放回收集管中。
(7)加入600 μL漂洗液PW(使用前先按照说明要求加入无水乙醇),12000 rpm离心30 s,弃滤液,再将吸附柱CB3放回收集管中。
注意:漂洗液PW应沿着吸附柱管壁加入,有助于冲洗沾在管壁上的成分。
(8)重复操作步骤7。
(9)12000 rpm离心2min,弃滤液。将吸附柱CB3在室温下静置5 min,晾干残留的漂洗液。
注意:漂 洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶 切、PCR等)实验。
(10)将吸附柱CB3转移入干净的离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加30μL洗脱液TE,室温下静置5 min,12000 rpm离心2min。
(11)再次悬空滴加20 μL洗脱液TE,室温下静置5 min,12000 rpm离心2 min,最后将溶液转移。
注意:洗脱液TE的体积至少要50μL,体积过小过大均会影响回收效率。洗脱前,可先将洗脱液TE放入56℃烘箱预热,以提高DNA的回收效率。DNA产物应保存在-20℃的冰箱里备用,防止DNA降解。
(12)制作浓度为1%的琼脂糖凝胶,进行电泳(U=150V,电泳时间约为30 min),用成像仪进行拍照并查看结果。
实验中应注意如下事项:
(1)实验试剂如Proteinase K,应避免反复冻融,否则会造成提取效果不好、提取的量下降;
(2)如果缓冲液GA或GB中出现沉淀,可先放入37℃的烘箱中使其重新溶解,将其摇匀后再使用;
(3)离心使用的都是台式离心机,并且都是在室温下进行的。
共3页:
上一页
1
2
3
下一页
上一篇:
外源NO-ABA对弱光胁迫下紫花苜蓿叶片超显微结构及光合关键酶活性的调控作用
下一篇:
长江刀鲚洄游过程中消化酶活性的初步研究
十大功劳叶抗炎活性的筛选的研究
常温土壤环境中嗜热香草...
NO.555定量分析方法的建立
碱胁迫对花生叶片膜脂过氧化的研究
Tas1r1鲜味基因在脊椎类动物中的进化规律分析
高光谱成像技术在豆奶粉...
番茄逆境响应基因SlERF26的...
大众媒体对公共政策制定的影响
酸性水汽提装置总汽提塔设计+CAD图纸
十二层带中心支撑钢结构...
乳业同业并购式全产业链...
中考体育项目与体育教学合理结合的研究
电站锅炉暖风器设计任务书
当代大学生慈善意识研究+文献综述
java+mysql车辆管理系统的设计+源代码
河岸冲刷和泥沙淤积的监测国内外研究现状
杂拟谷盗体内共生菌沃尔...
主页
计算机
机械
自动化
关闭菜单
栏目
毕业论文
计算机论文
经济论文
生物论文
数学论文
物理论文
机械论文
新闻传播论文
音乐舞蹈论文
法学论文
文学论文
材料科学
日语论文
英语论文
化学论文
自动化
管理论文
艺术论文
会计论文
土木工程
电子通信
食品科学
教学论文
医学论文
体育论文
论文下载
研究现状
任务书
开题报告
外文文献翻译
文献综述
范文
菜单
毕业论文
刷新
分享
收藏
关于
关闭
关闭
分享本页
返回
关闭
暂无收藏
全部清除
关闭菜单
About
751论文网手机版...
主页:
http://www.751com.cn
关闭
返回