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1.2.4 热激法转化大肠杆菌感受态 取100μL(1管)感受态菌液,放在冰上慢慢融化。取5μL连接产物,加入到融化的感受态细胞中,冰浴30min,42℃水浴1min30s,立即转入冰上冷却3min,加入600μL无抗性LB液体培养基,37℃,180rpm/min摇床震荡培养50min。4000rpm 离心3min,倒出上清,将剩余菌体重悬,均匀涂布抗性LB固体培养基,37℃过夜培养。10-12h后对长出的单克隆菌落进行鉴定。
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