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    表1供试杂草稻与栽培稻采集信息以及生物学性状
    Table 1 The collecting information and biological characteristics of the weedy and cultivated rice
    样品区域    采集地    经度    纬度    品种名    类型
    Area    Collected site     Longitude    Latitude    Biotype    Subspecies
    东北    丹东, 辽宁    124°17'E    39°58'N    丹粳17号(CR-DD)    粳型栽培稻
                    WRLN004(WR-DD)    粳型杂草稻
    华南    茂名, 广东    110°50'E    21°40'N    粤新占2号(CR-MM)    籼型栽培稻
                    WRGD008(WR-MM)    籼型杂草稻
    华东    扬州, 江苏    119°20'E    32°20'N    中莲恢950(CR-YZ)    籼型栽培稻
                    WRJS023(WR-YZ)    籼型杂草稻
        泰州, 江苏    119°57'E    32°26'N    南粳5055(CR-TZ)    粳型栽培稻
                    WRJS013(WR-TZ)    籼型杂草稻
    WR-DD:丹东杂草稻;CR-DD:丹东栽培稻;WR-MM:茂名杂草稻;CR-MM:茂名栽培稻;WR-YZ:扬州杂草稻;CR-YZ:扬州栽培稻; WR-TZ:泰州杂草稻;CR-TZ:泰州栽培稻。
    WR-DD: weedy rice from Dandong;CR-DD: cultivated rice from Dandong; WR- MM: weedy rice from Maoming; CR-MM: cultivated rice from Maoming; WR-YZ: weedy rice from Yangzhou; CR-YZ: cultivated rice from Yangzhou; WR-TZ: weedy rice from Taizhou; CR-TZ: cultivated rice from Taizhou.
    1.2 试验方法
    1.2.1杂草稻与栽培稻颖果显微结构的观察
    采取杂草稻与栽培稻花后不同天数的籽粒(3d、5d、7d、9d)至少10粒,小心去除颖壳后,迅速固定于FAA固定液(50%无水乙醇:福尔马林:冰醋酸:甘油=89:5:6:5)中。花后7d和9d的颖果用双面刀片切成厚约2mm的小段再固定。固定材料真空泵抽气24h以上, 4℃保存。
    参考康海岐(2008)[28]的方法,制作石蜡切片,具体步骤如下:脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、展片、粘片和染色。染色剂为Fasga染液,染色时间:10 min。
    在显微镜(ZEISS AxioCam-HRc)下观察杂草稻与栽培稻胚乳的胚乳切片并拍照,比较杂草稻与栽培稻的胚乳发育过程的差异。
    1.2.2杂草稻与栽培稻胚乳细胞活性的检测
    取花后不同天数(3d、5d、7d、9d、11d、13d、15d、18d、21d)的颖果剥去颖壳,为实验材料。
    TTC 染色:参考郑光华(1990)[29]的方法,,颖果用锋利的双面刀片剖开, 浸入到 0.5% TTC 染色液中,25℃室温下半小时后取出,在解剖镜下观察,并拍照。染成红色的部位为脱氢酶活性高,细胞呼吸旺盛的地方。
    Evans blue 染色:参考Young &Gallie( 1992)[30]的方法,颖果用锋利的双面刀片剖开,置于 0.1% 的 Evans blue 的水溶液中浸染 2-3 min,再以自来水浸洗 1h,在解剖镜下观察,并拍照。被染成蓝色的部位为死细胞。
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