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    摘要：ABC（ATP-Binding Cassette）转运蛋白是目前已知最大的蛋白质家族，其在生物进化中比较保守，功能之一为跨膜转运包括脂质在内的多种物质。但植物ABC转运蛋白与脂质合成和分泌的关系却少有报道。脂质的合成与分泌对生物的生存与理化反应有重要意义。脂质的合成与生物体内的物质运输有关，如脂质合成与囊泡的合成及运输之间相互作用，能够提升生物体内的物质运输效率。本项目从基因功能分析入手，成功克隆出了所需的大豆ABC转运蛋白编码基因，并且在敲除同类基因的酵母和拟南芥中表达，分析了该基因在油脂合成与分泌中的作用。28115
    毕业论文关键词：ABC转运蛋白； 基因功能； 脂质分泌
    The research of the functions of the ABC transporter proteins in lipid secretions
    Abstract： ATP-Binding Cassette(ABC) transporter is the greatest protein family ever known. ABC transporters are concerned as ralatively conserved protein across species. The main function of which is transporting physiological substrates such as lipid across membranes. As few plant ABC transporter of lipid were reported before, several new ABC transporter genes of Glycine max are found by homology analysis with those in Saccharomyces cerevisiaes. The synthesis and secretion of lipids is of great significance to the survival and physical and chemical reactions of organisms. The composition of lipids is related to the physical transport of the organism. Such as the interaction between lipid synthesis and vesicle synthesis and transport can improve the transport efficiency in the organism. This program starts with the genetic analysis, we have successfully cloned the genes of ABC transporter. These genes are then transferred into Saccharomyces cerevisiaes and Arabidopsis thaliana wild strain with lipid uptake deficiency for analysis of gene function.
    Key words: ATP-Binding Cassette(ABC) transporter；genes’ functions；lipid secretions
    目 录
    摘要    1
    关键词    1
    Abstract    1
    Key words    1
    引言    1
    1  材料与方法    2
    1.1 材料    2
    1.2 方法    2
    1.2.1 目的基因克隆    2
    1.2.2 重组质粒的构建    4
    1.2.3 大豆目的基因在酵母中的功能验证    4
    1.2.4 拟南芥的培育及目的基因在拟南芥中基因功能验证    4
    1.2.5 在烟草中进行基因表达的亚细胞定位观察    5
    2  结果与分析    5
    2.1同源序列的查找    5
    2.2基因克隆与载体构建    6
    2.3酵母突变体回补实验    7
    2.4拟南芥纯合体的筛选    10
    3  讨论    12
    3.1基因在酵母中的功能分析    12
    3.2基因在拟南芥中的功能分析    13
    致谢    13
    参考文献    13
    附录    14
    大豆ABC（ATP-Binding Cassette） 转运蛋白基因在脂质分泌中的功能研究
    ABC转运蛋白又称腺苷三磷酸结合盒式转运蛋白(ATP-binding cassette transporters)，广泛存在于原核生物和真核生物中。在植物界，以大豆和拟南芥为代表的ABC转运蛋白家族多达120种以上。越来越多的证据表明真核细胞中ABC转运蛋白参与细胞膜脂质分子的转运[1]，目前对拟南芥及酵母中ABC转运蛋白家族及其作用机理研究基本透彻，而大豆中的ABC转运蛋白家族基因报道却比较少。
    脂质的合成与分泌对生物的生存与理化反应有重要意义。首先，脂质的合成与生物体内的物质运输有关。如脂质合成与囊泡的合成及运输之间相互作用，能够提升生物体内的物质运输效率。同时，脂质可以保护生物、提高生物抗逆性。如植物叶片有角质层，主要成分为蜡质，可防止植物流失水分和抵抗微生物侵袭。对植物体内脂质的合成与分泌的研究具有非常重要的价值。
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