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摘要：安琪酵母为材料，用酵母完全培养基（YPD培养基）进行培养。通过划线培养，挑选出单菌落。经过镜检之后，选取活性高的菌株进行扩大培养。对培养至对数期的酵母，分别用不同浓度的CuS04和不同浓度的H2O2对酵母进行刺激处理，对刺激后酵母进行基因组DNA的提取并进行琼脂糖凝胶电泳实验，观察处理后与未经处理以及不同浓度处理后酵母菌基因组DNA的改变，进行分析。28759
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毕业论文关键词：酵母培养； 刺激处理； DNA提取； 凝胶电泳
Different Concentrations of H2O2, CuS04 Effect on Saccharomyces CerevisiaeGenome
Abstract：The experiment use Angel yeast as the material, which was incubated by yeast culture medium (YPD medium). After that, a single yeast colony was sorted out by streak cultivation. Then, a high activity yeast strains was selected under microscope to process secondary yeast propagator. On the train to log phase yeast, with different concentration of H2O2 and CuSO4, the yeasts were treated. the yeast of stimulus processing after centrifugal crushing, and by using polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE electrophoresis) on the treatment of yeast protein detection.
Key words: Yeast culture, Stimulation treatment, DNA extraction, Gel electrophoresis
目 录
摘要
Abstract 1
引言 1
1. 材料和方法 2
1.1 实验材料 2
1.1.1 菌株 2
1.1.2培养基和DNA提取试剂 2
1.1.3 主要试剂 3
1.1.4主要仪器 3
1.2 试验方法 4
1.2.1 酵母活化 4
1.2.2 酵母菌的初筛 4
1.2.3 酵母菌的复筛 4
1.2.4 酵母菌的鉴定 4
1.2.5酵母菌的扩大培养 5
1.3酵母菌的氧化刺激 5
1.3.1用不同浓度的H2O2溶液对酵母进行刺激处理 5
1.3.2分别用不同浓度的CuS04溶液对酵母进行刺激处理 5
1.4酵母菌基因组DNA的提取 5
1.4.1不同浓度H2O2溶液处理后的酵母菌基因组DNA的提取 5
1.4.2不同浓度CuS04溶液处理后的酵母菌基因组DNA的提取 6
1.5不同浓度H2O2溶液处理后的酵母基因组DNA琼脂糖凝胶电泳 7
1.5.1不同浓度H2O2溶液处理后的酵母基因组DNA琼脂糖凝胶电泳 7
1.5.2不同浓度CuS04溶液处理后的酵母菌基因组DNA的提取 8
2结果与分析 9
2.1酵母菌的活化 9
2.2初筛结果 10
2.3酵母菌DNA电泳结果 12
2.3.1不同浓度H2O2处理后酵母菌电泳结果 12
3结论与展望 13
参考文献 14
致谢 16
不同浓度的H2O2，CuS04对酿酒酵母基因组的影响
引言
酵母是一种单细胞真菌，在有氧和无氧环境下都能生存，属于兼性厌氧菌。酵母基因组中平均每隔2kb就存在一个编码蛋白质的基因，即整个基因组有72%的核苷酸顺序由开放阅读框组成。说明酵母基因比其它高等真核生物基因排列紧密。科学家通过序列测定揭示了酵母基因组中大范围的碱基组成变化 。酵母基因组另一个明显的特征是含有许多DNA重复序列，其中一部分为完全相同的DNA序列，如rDNA与CUP1基因、Ty因子及其衍生的单一LTR序列等。许多酵母遗传学家认为，弄清遗传丰余的真正本质和功能意义，以及发展与此有关的实验方法，是揭示酵母基因组全部基因功能的主要困难和中心问题。