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摘 要：本课题拟从稀土元素镧对淡水涡虫生长的影响出发，以北京樱桃沟淡水涡虫为材料，用不同浓度的lacl3溶液进行涡虫的再生培养，通过制备细胞涂片以及银染和镜检等步骤，观察并统计细胞核仁的畸变率。以此研究对淡水La3+ 涡虫干细胞的分化影响以及其核仁结构的变化。分析结果表明，随着lacl3浓度的不断增加，核仁畸变率也不断增加，当浓度达到0.5mM时，细胞核仁解体，说明La3+ 可以促进淡水涡虫细胞核仁的畸变，即其对淡水涡虫干细胞分化具有抑制作用。34985
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毕业论文关键词：淡水涡虫;lacl3;核仁畸变;再生;干细胞
Different concentration of La3 + impact on freshwater planaria nucleoli morphological structure
Abstract：This topic from the influence of rare earth element lanthanum on freshwater planaria growth, Beijing be freshwater planaria as material, lacl3 solution with different concentration of planaria regeneration of culture, through the preparation of cell smears and steps, such as silver stain and microscopy observation and statistical cell nucleolus aberration rate. This study la3 + effect on freshwater planaria stem cell differentiation and the changing structure of the nucleolus. The analysis results show that with increasing concentration of lacl3, nucleolus aberration rate also increased, when the concentration is 0.5 mM, disintegration of cell nucleolus, La3 + freshwater planaria can promote cell nucleolus distortion, namely its has inhibitory effect on freshwater planaria stem cell differentiation.
Key words：freshwater planaria ; lacl3; nucleolus distortion ; regeneration; stem cells
目 录
摘 要： 1
Abstract： 1
引言 2
1. 材料与方法 3
1.1 实验材料 3
1.2 处理方法 3
1.2.1淡水涡虫再生实验 3
1.2.2 制备细胞涂片 3
1.2.3银染 3
1.3 测定项目与方法 3
2.结果 4
2.1 再生观察结果 4
2.2银染结果 4
2.3核仁畸变结果 5
3.结果分析 6
4.讨论 6
参考文献 8
致谢 10
不同浓度La3+对淡水涡虫核仁形态结构的影响
引言
淡水涡虫是扁形动物门中营自由爬行生活的一类动物，它有有一些脊椎动物的关键特征，如三胚层和前后轴，两侧对称，背腹轴具有极性，以及其头部呈集中趋势，神经细胞在虫体前端集中形成脑[1]。扁形动物的出现,成为动物演化历史进程中动物界开始由水生向陆生、由固着或漂浮生活向自由爬行生活过渡的重要标志,其在形态上也相应演化出一系列关键性的变化，因此在动物进化过程中占据重要地位[2]。由于它们对水质变化十分敏感,因此是一类很好的水体污染的指示动物;同时,由于其再能力特别强,因而又是研究细胞分化与脱分化分子机理的好材料[4]。研究表明，涡虫之所以具有惊人的再生能力与一种具有自我更新能力的成体多潜能干细胞群———neoblasts 有关，干细胞是成 体涡虫 中唯一具有增殖分裂能力的细胞[5-7]。这些特征吸引着一代又一代动物学家的关注，百年来一直是国际动物界热衷探索的研究领域。其分类地位也一直存在争议。由于涡虫没有肛门，过去一直把它放在两侧动物分支进化树的根部。近年来，根据188rRNA序列，肌动蛋白重链DNA序列和Hox基因的数量和类型等分子生物学资料，动物学家倾向于把扁形动物纳入一个新的分类--冠类动物[8-10]。 它具有极强的再生能力，淡水涡虫作为研究发育和再生的模式生物已有200多年的历史，同时它也是研究动物起源、进化、胚胎发育、干细胞以及细胞分化与脱分化分子机理的良好材料，淡水涡虫染色体的研究为遗传和进化等研究提供依据[2]。人们对淡水涡虫的研究可追溯到1890年，从上世纪70年代以来，研究日趋深入，主要以三角涡虫和多目涡虫为研究对象。尤其是近几年，涡虫研究走向分子生物学和功能基因组学领域。镧作为一种稀土元素，是人和动物机体所需的一类微量元素, 在动物免疫中具有重要的作用。适量补充 稀土元素可以提高机体的免疫力, 大剂量则有抑制作用[3]。同时，对淡水生物的影响研究表明，微量的镧对淡水生物有促进生长和改良品质等作用[10]，例如，微量的镧可以促进鲤鱼的胚胎发育和虾卵子的孵化，它也可以抑制草鱼“三大病”的病菌的生长和繁衍[11]。添加微量稀土元素对促进动物生长、改善品质、提高动物机体免疫力具有明显作用, 并且具有非常好的安全性；而大剂量的补充, 则会产生致癌、致突变作用[3]。那么不同浓度的la3+ 对淡水涡虫的再生和干细胞的分化又有什么影响呢？它会不会影响涡虫细胞核仁的畸变呢？本实验要研究的就是la3+对淡水涡虫细胞核仁的影响。