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三七总皂甙提取率/%=三七总皂甙含量(g)/三七粗粉质量(g)×100
1.3.3实验设计
利用单因素试验,研究乙醇浓度、料液比和超声温度三个因素对三七总皂甙提取率的影响;在此基础上设计正交试验得出最优的超声波提取条件。
固定超声波提取条件,通过单因素试验,研究酶解时间、酶解温度、酶用量和pH值四个因素对三七总皂甙提取率的影响;随后利用响应面试验确定出最佳的纤文素酶辅助提取条件。
1.3.4 三七总皂甙的抗氧化性测定
1.3.4.1对超氧阴离子的清除作用
采用邻苯三酚法[9]。在碱性环境中邻苯三酚会发生自氧化链式反应并且释放出大量的氧气,氧气会加速邻苯三酚的自氧化速率,在可见光区生成一系列有特征吸收光谱的中间产物。若向反应体系中加入抗氧化物则可以清除产生的氧气,抑制中间产物的生成,从而降低邻苯三酚的自氧化速率,使反应溶液体系在320 nm处的吸光度降低。通过比较样品与对照组邻苯三酚的自氧化速率可以评价受试物的抗氧化能力。
样品的测定:取10 mL邻苯三酚溶液(40 mmol/L),加入5 mL三七总皂甙提取液,在5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min时测定其吸光度值(320 nm)。对照组的测定:在三七总皂甙的提取液中加入5 mL蒸馏水作为空白对照,按上述方法测定吸光度值。
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