菜单
  

    1  材料与方法
    1.1  研究材料
    本研究以水稻野生型日本晴(ssp. japonica cv. Nipponbare)及本实验室新发展的转基因植株(OsNAC300p:GUS;OsNAC300过表达植株)为研究材料。
    1.2  研究材料培养
    选取饱的水稻种子,置于自来水中黑暗条件下30°C浸泡72 hr,至种子露白;挑选露白情况一致的种子,漂浮在0.5 mM CaCl2溶液(具孔浮网)上于30°C,黑暗条件下(锡纸遮光)72 hr育根;换用1/2 木村B完全营养液培养,置于光照培养室(光照周期为:光照/黑暗=12 hr/12 hr,温度为30°C)。
    1.3  试剂
    1/2木村B完全营养液(终浓度,去离子水溶解 pH 5.5)
    Macro elements:
    KH2PO4, 0.091 mM;MgSO4•7H2O, 0.273 mM;(NH4)2SO4, 0.182 mM;
    KNO3, 0.091 mM;Ca(NO3)2•4H2O, 0.183 mM。
    Micro elements:
    H3BO3, 3 μM;MnCl4•4H2O, 0.5 μM;(NH4)6Mo7O24•4H2O, 1 μM;
    ZnSO4•7H2O, 0.4 μM;CuSO4•5H2O, 0.2 μM;Fe3+-EDTA, 20 μM。
    磷酸缓冲液(pH 7.0)NaH2PO4•2H2O, 78 mM;Na2HPO4•7H2O, 122 mM;
    Na2EDTA溶液 50 mM;
    K3[Fe(CN)6]溶液 40 mM;
    K4[Fe(CN)6]溶液 40 mM;
    CdCl2溶液 50 mM;
    1.4  分析检测
    1.4.1  OsNAC300过表达材料镉胁迫下生长指标的测定
    (1)处理。选取生长正常、一致的幼苗分组进行处理,设置0、0.5、5和50 μM四种浓度镉处理;取50 mM CdCl2加入1/2 木村B完全营养液培养中,配制四种浓度镉处理的营养液;每种浓度镉处理设置NIP、NAC300-OE5和NAC300-OE6三组,每组设置三个重复,每个重复移栽2株水稻幼苗,置于光照培养室(光照周期为:光照/黑暗=16 hr/8 hr,温度为30°C),处理72 hr。
    (2)取样。将植株地下部分用5 mM CaCl2涮洗4次,擦拭干净,并用直尺测量每株水稻幼苗地上部和地下部长度。分离植株的地上部分和地下部,将每个重复的地上部分和地下部分分别放入两个牛皮纸信封中,置于80°C烘箱烘干72 hr,并称量每个重复的地上部分和地下部分干重。
    1.4.2  消煮
    (1)冷消煮。将称重后的样品加入已洗净、烘干的消煮管中。在通风橱中配制V(HNO3):V(HClO4) = 87:13的比例的混酸,向每根消煮管中加入5 ml混酸,并用保鲜膜封住管口,在通风橱中静置12 hr。
  1. 上一篇:花生叶绿素荧光动力学参数研究
  2. 下一篇:禾谷镰孢菌中6个同源FgAAT2基因敲除载体的构建及敲除突变体的获得与鉴定
  1. 番茄逆境响应基因SlERF26的...

  2. 不同pH条件下小麦生长的生理响应研究

  3. 一次平衡法研究水稻土中...

  4. 温度胁迫对水稻种子萌发...

  5. 水稻种子无菌苗培养的条件筛选

  6. 水稻外源基因CaMV35S启动子...

  7. 水稻外源基因NPTⅡ的定性及定量检测分析

  8. 中考体育项目与体育教学合理结合的研究

  9. 十二层带中心支撑钢结构...

  10. java+mysql车辆管理系统的设计+源代码

  11. 当代大学生慈善意识研究+文献综述

  12. 大众媒体对公共政策制定的影响

  13. 杂拟谷盗体内共生菌沃尔...

  14. 河岸冲刷和泥沙淤积的监测国内外研究现状

  15. 酸性水汽提装置总汽提塔设计+CAD图纸

  16. 电站锅炉暖风器设计任务书

  17. 乳业同业并购式全产业链...

  

About

751论文网手机版...

主页:http://www.751com.cn

关闭返回