本文主要是研究原花青素对铅诱导小鼠肝脏的保护作用。选择健康生长状态基本相同小白鼠40只,体重在170-200g左右,随机分成5组:正常对照组、原花青素处理组、铅处理组、原花青素加铅一组、原花青素加铅二组。进行等量食物灌胃,1次/天。连续30d,自由饮水。经过上述实验处理过后,颈椎脱位法处死小白鼠,取其肝脏经行称重冷冻保存。实验是运用分光光度法检测各个组小白鼠肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶((SOD )、谷肤甘肤过氧化物酶(GSH-Px )和过氧化氢酶(CAT)活力,与对照组进行比较得出初步结论。根据实验所得到的三种酶活力、小鼠体内的铅含量变化、小鼠死亡率。综合对照组和含铅组分析,再结合原花青素浓度和铅水浓度看出小鼠的精神状态,饮食量等等的变化情况。
实验部分
1. 材料与方法
1.1供试材料
1.1.1实验动物
昆明小鼠(徐州医学院动物养殖中心提前购买)。
1.1.2实验试剂
前期处理动物试剂:
供小鼠饮用不同浓度的铅水溶液的配制。
原花青素(南京建成生物工程公司) 生理盐水(0.9%) 无水乙醇 铅。
注:试剂均为分析纯试剂。
(二)超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒组成:
试剂 方法
试剂一 储备液10ml×1瓶。试剂一应用液的配制:用时每瓶加蒸馏水稀释至100ml,4 ℃保存一年。
试剂二 液体10ml×1瓶,4 ℃-10℃保存一年。
试剂三 液体10ml×1瓶,4 ℃-10℃保存一年。
试剂四 液体350微升×2支,4 ℃保存不可冷冻;4号稀释液10ml×1瓶,4 ℃保存6个月。用时两者按1:14稀释,需要多少配多少。配好后的试剂4℃保存,不可冷冻。
注:所用吸嘴为一次性吸嘴。
试剂五 粉末试剂瓶,用70°- 80°75ml热蒸馏水溶解后的备份,如果水蒸气的加热过程发减少,这必须是蒸馏水到75ml,1年与4°C保存后冷光线好的试剂。
试剂751 粉剂×1瓶,用的时候加蒸馏水至75ml,将配好后的试剂避光冷藏于4℃保存6个月。
显色剂的配制:按试剂五:试剂751:冰醋酸=3:3:2 按体积比配比显色剂,避光冷藏于4℃保存3个月.
试剂七 液体30ml×1瓶,冷藏于4 ℃保存6个月。
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