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    1 材料和方法
    1.1试验材料
    绿豆,为绿豆豫绿4号(Vigna radiata L.Wilclzek Yulv4),购于周口市农科院。
    库拉索芦荟(Aloe vera),于市场购买。
    1.2材料处理    
        将2节5号电池剥开,放入烧杯中,加入1000ml的蒸馏水进行浸泡24h后,先用纱布过滤,再用滤纸过滤三遍,得电池浸出液母液。把废电池母液和蒸馏水按照1:4的比例稀释,得稀释液。另取2-3年生的库拉索芦荟叶片,洗干净,擦干,用不锈钢刀剥去叶片外皮,得到芦荟凝胶,再利用高速组织捣碎机将凝胶打成匀浆,再用四层纱布过滤得出库拉索芦荟汁。用1:4废电池将芦荟汁配成0,25,50,100,200g/L的溶液,并编号2-6,以1号(蒸馏水)为对照。
    选择品相较好的,饱满的绿豆种子,用10%的NaClO消毒10 min后,用蒸馏水冲洗干净,将种子分为751份,每份50粒,重复三次,然后用含有不同浓度库拉索芦荟汁的废电池液浸种,48h后,种在相应编号含有等质量的经过筛选和翻晒的土壤的培养皿中,在室温下培养,在长出四片真叶后,选取同位叶测量指标,每样重复三次,在实验过程中,每48h浇一次相同编号的等量的溶液。
    1.3生理指标的测定
    1.3.1  游离脯氨酸含量的测定  采用磺基水杨酸浸提法[16]。称取0.2g绿豆叶片,放在试管中并加入磺基水杨酸溶液。沸水浴,10min后,取出并冷却,然后过滤。吸取2ml过滤液放在带塞试管中,并加入冰醋酸、酸性印三酮试剂,再次沸水浴,30min后,取出并冷却。然后加入甲苯,摇晃,取出上层液放入离心管中。于3000r/min,离心5min。离心完成后,取上层液在520nm处测吸光度,然后根据其标准曲线计算脯氨酸的含量。
    1.3.2可溶性蛋白质含量的测定  采用考马斯亮蓝G-250 显色法[16]。称取绿豆叶片0.2g,加入0.1mol/l的磷酸缓冲液1ml,于低温下研磨,并于12000r/min离心得出待测液。取出0.1ml与5ml考马斯亮蓝溶液反应,放置5min后,以考马斯亮蓝溶液为对照,在595nm处测定吸光值。根据其标准曲线,计算出蛋白质的含量。
    1.3.3电导率的测定  采用李合生的方法[16],称取绿豆叶片0.2g,洗净,然后用无离子水冲洗三遍,吸干水分后剪碎,放入盛有20ml的无离子水的三角瓶中,用真空抽气泵抽气,然后在30℃下放置4h,使用电导率仪测量其电导率值,再将其放入沸水中加热15min,冷却并定溶至20ml,于25℃静置30min,再次测量电导率,并根据公式测量其相对电导率。
    1.3.4丙二醛的测定  采用硫代巴比妥酸(TBA)法[17]。称取绿豆叶片0.2g,加入1ml的蒸馏水研磨,并转移到试管中,再加5ml的硫代巴比妥酸溶液,于沸水中放置10min,取出并放入冷水中冷却,然后在3000r/min的条件下离心15min,取上清液,并测其于450nm、532nm和600nm处的值,然后计算出丙二醛的含量。
        测定结果采用EXCEL软件处理作图。
    2 结果与分析
    2.1库拉索芦荟汁对废电池胁迫下绿豆幼苗电导率的影响
    植物细胞膜对于文持细胞的正常代谢有重要的作用,当受到逆境的胁迫时,细胞膜的透性增大,电解质外渗,植物细胞的浸提液的电导率就会增加。因此,可以用电导率的高低,代表质膜透性的大小,细胞膜的透性与胁迫程度有关,也与植物的抗逆性能力强弱有关。
     
    图1  绿豆叶片的电导率大小的变化
    如图所示,6组中相对对照组的电导率而言,废电池处理组的电导率有明显升高,是蒸馏水处理组的7.03倍,电导率的升高,说明了细胞膜的完整性有损伤,库拉索芦荟汁处理,使叶片的电导率明显下降。可以看出,随着库拉索芦荟汁的浓度的增加,叶片电导率的变化呈现出先降低后升高的趋势,在50g/L的时候,叶片电导率达到了最小值,比废电池处理组的减小了87.6%,芦荟汁浓度达到在100g/L时,电导率出现了明显的上升,甚至高于废电池处理组。说明一定浓度的库拉索芦荟汁,能缓解绿豆叶片细胞的电解质外渗,浓度过高或者过低,则会对缓解程度造成一定的影响。
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