(3) 吸取上清液至1.5ml的新离心管,加入200μl的氯仿,上下剧烈振摇3min,室温放置至分层,再以4℃,12000rpm的设置离心10min。重复(3)操作一次。
(4) 吸取上清液,加入500μl预冷的异丙醇,混合均匀,室温下静置5-10min,以4℃,12000rpm的设置离心10min,弃上清。
(5) 加入1ml浓度为75%的乙醇溶液,轻柔振荡离心管,悬浮沉淀,再以4℃,12000rpm离心5min,室温下晾干至半透明状。
(6) 加入20-50μl的DEPC-H2O溶解沉淀,60℃恒温水浴10min,取1μl样液检测RNA样品浓度和纯度,另取3μl样液电泳,检测RNA样品的完整性。