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2.4流式细胞仪检测细胞凋亡率 7
2.5 琼脂凝胶电泳DNA-Ladder检测细胞凋亡 7
2.6流式细胞仪检测细胞内ROS变化规律 7
2.7微量还原型谷胱甘肽(GSH)的测定 7
2.8微量丙二醛(MDA)检测 8
2.9 实验数据处理 8
3 结果 8
3.1 鲫鱼淋巴细胞凋亡率 8
3.2 鲫鱼淋巴细胞凋亡的DNA-Ladder检测 9
3.3 鲫鱼淋巴细胞内的ROS水平 10
3.4鲫鱼淋巴细胞内的MDA的变化 11
3.5 鲫鱼淋巴细胞内的GSH含量的变化 12
4 讨论 13
参考文献 14
致谢 16
1 引言
全氟化合物(PFCs)是一类新型持久性有机污染物，在1951年由3M公司研制成功之后，因其优良的化学稳定性、热稳定性、高表面活性及疏水疏油性能，被广泛的应用到食品添加剂、润滑剂、表面活性剂等一系列的生活、工业用品之中[1]。其是有机氟化物的一种，当分子中所有的C-H键全部转化为C-F键时，此类有机氟化物称为全氟类化合物。由于氟是负电性最强的元素，C-F键的键能极强，因此此类化合物具有极强的持久性和难降解特性。同时，当PFCs排入环境后，生物体通过捕食作用将其摄入体内后，PFCs还能在生物体中蓄积，对生物体的健康产生一系列不良影响。全氟辛酸（PFOA）是PFCs中的最具代表性的物质之一，已被大量的应用在纺织、化工、涂料、皮革、炊具制造、合成洗涤剂等多种与人类日常生活密切相关的生产之中。研究表明，在1951至2004年，全球PFOA的生产总量约为3600-5700吨，其中约400-700吨被排入环境之中[2]。可见，这种有机污染物在世界范围内广泛分布，成为严重威胁生态环境和人类健康的隐患。此外，全氟辛磺酸（PFOS）也是PFCs的代表性物质之一，与PFOA具有类似的污染特性，也早已被广泛使用和生产。自2001年之后，美国环保局就已将PFOS列入持久性环境污染物名单，对其的生产进行严格管理。学界内认为PFOS和PFOA是继二噁英和多氯联苯之后的造成全球性环境问题的新的持久性污染物，并将会成为今后环境科学以及预防医学领域的重点研究方向[3]。
许多国家的研究者在多种环境介质中发现了PFCs的存在。Yamashita[4]于2002-2004年对东太平洋中部的19个区域、苏禄海和南中国海5个区域、拉布拉多海域20个区域以及大西洋12个区域的浅层海水进行检测，80%的样品中均可检出PFCs；尽管近海岸区域的PFCs的浓度远高于公海中的浓度，研究人员在1000m的深海中也发现了痕量的PFCs。Wei等[5]于2007年调查发现PFOA和PFOS是西太平洋、印度洋沿海和公海区域与近南极地区的主要污染物，并分析海域以及极地地区的PFOA污染与内陆河流受到较严重的污染有关。LOOS等[6]在波河(靠近意大利亚历山德里亚)检测出PFOA的含量为60-174ng/L,其支流塔纳罗河中的含量为1.3μg/L。日本一项研究结果显示，鹤见川河中含有多种PFCs，且采样点的PFCs的浓度并未随着水流速度的升高而下降，反而呈现出保持不变或增加的趋势[7]。Lien等[8]对日本淀川河的调查研究表明，PFOA的浓度为4.2-2600ng/L，PFOS的浓度为0.4-123ng/L并得出工业污水可能是导致淀川河PFOA和PFOS污染的原因。