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3.2.4 乙醇浓度对多糖含量的影响 - 13 -
3.2.5 乙醇体积比对多糖含量的影响·- 14 -
3.2.6 醇沉时间对多糖含量的影响 - 15 -
3.3 正交实验结果与分析··· - 16 -
3.3.1 提取沪农灵芝子实体多糖的最优条件···- 16 -
3.3.1 提取龙芝一号子实体多糖的最优条件···- 17 -
3.4 最优条件下得率计算··· - 18 -
3.4.1 沪农灵芝子实体多糖得率··· - 18 -
3.4.2 龙芝一号子实体多糖得率··· - 18 -
3.5 理化性质- 18 -
3.5.1 外观· - 18 -
3.5.2 粘度· - 19 -
3.5.3 pH 值 - 19 -
3.6 红外光谱- 19 -
3.7高速液相分析·· - 21 -
3.8 DPPH自由基清除能力的测定 - 22 -
4 结论 - 22 -
5 心得与展望·· - 23 -
5.1 毕业设计心得· - 23 -
5.2毕业设计展望·· - 23 -
1 绪论1.1 灵芝多糖的简介灵芝（Ganoderma Lucidum）又名琼珍、林中灵是多孔菌科真菌灵芝的子实体。灵芝具有止咳平喘、补气安神、延年益寿的功效，可以用于缓解虚劳咳喘、神经衰弱、心悸气短、晕眩不眠。灵芝多糖为多孔菌科灵芝属真菌菌丝体的次级代谢产物， 灵芝多糖存在于菌丝体和子实体之中。灵芝多糖是灵芝最有效的成分之一，具有多方面的药理活性，灵芝多糖可以提高人体免疫力，加速血液循环，提高血液的供氧能力，消除体内自由基，提高肝脏、血液、骨髓合成 RNA和 DNA。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。因此，灵芝多糖的研究受到了越来越多科学工作者的重视。
1.1.1 灵芝多糖的结构灵芝多糖是由三股单糖链构成的，具有三级结构的葡聚糖，它的立体结构与 DHA、RNA 相似，是一种大分子化合物，灵芝多糖大部分是从灵芝子实体以及灵芝孢子粉中提取而来，其分子量从数千到数十万。灵芝多糖存在于灵芝细胞的细胞壁内壁。单糖间的糖苷键连接通常有 1,3、1,4、1,6数种。其中大多为β型结构，少数糖苷键为α型结构。大部分多糖链具有分支，少数多糖链含有小分子肤链。具有高密度的多糖链分枝或者含有肤链的多糖其药理活性也更高。多糖的药理活性与单糖间糖苷键的结合相关。单糖间以β-1,3、1,6 或者β-1,4、1,6-糖苷键链接的多糖具有药理活性。而单纯以β-1,4-糖苷键连接的多糖则没有药理活性。除此之外，如果多糖的立体结构被破坏，那么它的活性也会大大降低。1.1.2 灵芝多糖的性质灵芝多糖不能溶于高浓度的乙醇，微溶于低浓度的乙醇和冷水，但其可以全部溶解在热水之中。但温度的升高也会引起多糖中糖苷键的断裂，并且形成糖单体，影响灵芝多糖的活性。不同灵芝多糖在单糖组成、分子量、溶解度和旋光度等理化性质方面存在显著差异。在目前已经提取到的灵芝多糖中，大多数为异多糖。灵芝子实体结构紧密，具有较高维持力，而灵芝多糖又存在于细胞壁内部，比较难渗出。因此研究人员利用超声波、微波等方法使灵芝的结构层发生改变，扩大透析膜径，使得灵芝多糖能够尽快释放。
1.2 国内外对灵芝子实体多糖提取的研究李凤林等人[1]确定了灵芝多糖超声波提取最佳工艺条件，通过单因素试验与正交回归组合设计对其进行优化。结果表明，灵芝多糖超声波提取最佳工艺条件为料液比（g ／mL）1∶35，超声功率 80 W，超声温度 50 ℃，超声时间 35 min，此条件下灵芝多糖实际提取率为 2．06％。周吴萍[2]以灵芝为原料提取多糖，采用蒽酮－硫酸法测定提取液中的多糖含量，设计单因素试验考察提取方法和提取溶剂组合对多糖提取率的影响， 并采用正交设计优化提取工艺。源Y自Z751W.论~文'网·www.751com.cn结果表明，采用回流提取法，先后以蒸馏水和体积分数 55％的乙醇溶液作提取溶剂，每次提取时浸润时间 0．5 h、料液比（m 灵芝∶V 提取溶剂）为1∶20（g ／mL）、提取时间 1．5 h，所得灵芝多糖的提取率较高，为 1．75％。王谦， 钱先来[3]为了探寻一种高效的灵芝多糖提取方法， 采用单因子分析和正交实验。对弱碱性介质下微波法提取灵芝多糖进行了优化研究。 各因素对灵芝多糖提取的影响依次为提取时间、pH 值、固液质量比、预浸时间。最适条件为预浸 1.5 h，提取 15 min，固液质量比 1 :110 ， pH 8.0 ，提取 2次。灵芝多糖提取率 3.200 %,结果表明：该方法能显著提高灵芝多糖的提取率。吕兴萍等人[4]利用纤维素酶从灵芝子实体中提取灵芝多糖，通过单因素实验研究酶量、酶解时间、料液比、酶解温度对灵芝多糖提取率的影响。实验结果表明：纤维素酶能够显著提高灵芝多糖的提取率，提取的最佳工艺条件为酶量 2.0％，酶解时间 90min，料液比 1:30，温度50℃。Ruey Chi Hsu[8]用超临界 CO2 萃取和乙醇改性来提取灵芝多糖。 研究表明超临界提取适合的提取灵芝多糖。超临界萃取具有较高的提取率,比传统的溶剂萃取的提取温度更低，可以有效保护多糖结构不被破坏。Liyan Zhao[9]等人将超声波利用于灵芝多糖提取。并且将粗多糖被过滤净化，用纤维素-52 色谱法进行检测。在这项研究中，对灵芝多糖的分子量，单糖组成、紫外光谱和红外光谱等数据进行了分析。