丝瓜(Towel gourd)是原产于印度的一种葫芦科植物,又称菜瓜。果为夏季蔬菜,所含各类营养在瓜类食物中较高,所含皂甙类物质、丝瓜苦质、黏液质、木胶、瓜氨酸、木聚糖和干扰素等物质具有一定的特殊作用。
芹菜(Celery)又名“香芹”,亦称"药芹",属伞形科植物。富含胡萝卜素、B族维生素等抗氧化性物质,芹菜具有有健胃利血、降低血压、健脑镇静、平肝清热,祛风利湿,凉血止血的功效。经常实用芹菜,特别是吃芹菜叶,可以有效的预防高血压、动脉硬化等疾病,并有辅助治疗作用。
本文以四种常见蔬菜(豆苗、紫椰菜、丝瓜及芹菜)为研究对象,选取水、50%的乙醇、无水乙醇、50%的丙酮、丙酮为5种溶剂,分别提取这四种蔬菜的抗氧化活性物质,进行抗氧化活性清除率的测定,比较不同溶剂提取同种蔬菜的抗氧化性物质能力的强弱,及同种溶剂提取不同蔬菜的抗氧化性物质的抗氧化物质能力的强弱。结果为果蔬生理功能研究、人类的饮食调理、果蔬的加工处理、果蔬的贮存、运输等提供一定参考。
2 材料与方法
2.1 材料
新鲜的豆苗、紫椰菜、丝瓜及芹菜,均购自大润发超市。
2.2 试剂
甲醇、无水乙醇、丙酮均为分析纯,国药集团化学试剂有限公司。
DPPH(1,1-二苯-2-苦肼基),日本,TCI。
2.3 仪器
BS224S电子天平 Sartorius;KQ-500B型超声波清洗器 昆山禾创超声仪器有限公司;RE-300旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂;SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵 郑州长城科工贸有限公司;LGJ-10冷冻干燥机 北京四环科学仪器厂;Vacucell真空干燥机 德国3M公司; Centrifuge 5810R台式高速冷冻离心机 EPPENDORF公司;infinite M200pro多功能酶标 TECAN公司。
2.4 实验方法
2.4.1 样品的预处理
将四种果蔬(豆苗、紫椰菜、丝瓜、芹菜)样品用蒸馏水冲洗干净,除去水果中的核等杂质后切片,并置于-20℃的冷冻室冷冻,冷冻3天后取出放在冷冻干燥机中干燥,待完全干燥后进行碾磨粉碎,保存于真空干燥箱中,备用。从干燥箱中取出处理后的样品,称量。四种蔬菜分别称取适量的干燥后样品各5份于锥形瓶中。
2.4.2 DPPH溶液配制
反应液即DPPH液,准确称取4.97mgDPPH,用纯甲醇溶液溶解并定容于100ml棕色容量瓶中,封口,置于干燥避光处,备用。
2.4.3 提取液的制备源`自,751`.论"文|网[www.751com.cn
样品液都以1:40的固液比,用水、丙酮、50%丙酮、乙醇及50%乙醇这五溶剂提取豆苗、紫椰菜、丝瓜及芹菜样品,其中,以50%丙酮与丙酮为提取液的样品液需要常温超声1h,水提、醇提和50%醇提的样品液60℃水浴超声1h。抽滤,将滤液倒入已经称量标记的鸡心瓶,于旋转蒸发器上浓缩,直到提取液呈粘稠状再放入真空干燥机至干。
2.4.4 提取物溶液的配制
精确称量干燥后的提取物,将其配制成浓度范围为1mg/ml~10mg/ml的提取物溶液,以此提取物溶液进行抗氧化活性测定。
2.4.5 抗氧化性的测定
参考文献[11]的方法并略微修改,DPPH法,即取待测溶液10μL于96孔板中,在加入190μL 0.1mmol/L DPPH•甲醇溶液,暗处反应30min后,在517nm处测定吸光度,同时以溶剂代替试样作空白对照,DPPH•清除率按(1)式计算。
DPPH•清除率=(Ac-As)/Ac×100% (1)
式中:As为试样溶液与DPPH•反应后吸光度值,Ac为溶剂空白吸光度值。