LED(发光二极管)具备节能环保、光电转换效率高、寿命长[9]、适用性、环保无有害金属、便于回收利用等优势,成功解决了现代温室技术消耗能量较高的弊端。同时LED(发光二极管)光源发热量小,光质纯,波长恰好与植物光形态建成的光谱范围相符。而且LED是冷光源,热辐射小,可以较近距离的照射植物[10]。本试验研究不同光质对菊花心幼苗VC、可溶性蛋白和可溶性糖等的影响,为菊花心生产栽培中的光质调控提供一定的指导意义。
2 材料与方法
2.1 试验材料
试验材料:菊花心,丰邦优选。
2.2 试验设计
选用成熟度好,颗粒饱满,大小适宜的菊花心种子。将其用温汤浸种,酒精消毒灭菌后进行播种,其中播种的基质为蛭石和珍珠岩,将它们按1∶1的比例充分混合。培养液为MS大量元素,共培养20瓶,每瓶播种15粒种子。种子露白后将它们分别放入白光(CK)、蓝光(B)、红光(R)和红蓝混合光(RB,R∶B=1∶1)下培养,3次重复。红色和蓝色LED的光源峰值波长为660nm和450nm。培养箱内相对湿度为(75±5)%,温度为(25±2)℃,光照为14h/d。培养20天后测量菊花心幼苗中的VC含量、可溶性蛋白含量和可溶性糖含量。
2.3 测定指标与方法
用2,6-二氯酚靛酚滴定法定量测定VC:称取1g样品(新鲜叶片)加少量2%草酸,用研钵磨成浆,转入离心管中在4℃、12000r下离心20min。将上清液转入25ml容量瓶后用2%草酸定容。准确吸取0.1mg/ml的标准坏血酸溶液各1.0ml,分别置入两个100ml锥形瓶中,再加入1%草酸9ml,用微量滴定管以0.1%的2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色,并保持15s即为终点。用1ml染料相当于多少mg的VC的方法计算出T值(平均值)。准确吸取已制备好的的样品滤液每份10.0ml,共两份。分别放入两个100ml锥形瓶内,滴定方法同上。
用考马斯亮蓝G—250测定可溶性蛋白含量:称取0.8g样品(新鲜叶片)加入5ml蒸馏水用研钵研磨成浆,转入25ml容量瓶后,用蒸馏水定容,用漏斗(+脱脂药棉)过滤,吸取滤液1.0ml,放入试管中(每个样品设置两个重复),加入5ml考马斯亮蓝G—250溶液,震荡混合,放置2min后用721分光光度计在595nm下比色,记录吸光值,并通过标准曲线查的可溶性蛋白含量。以蒸馏水为对照。
用蒽酮法测定可溶性糖含量:称取1g样品(新鲜叶片)放入大试管中,加入15ml蒸馏水,在沸水浴中煮沸20min,取出冷却过滤,加入100ml容量瓶中,用蒸馏水冲洗残渣数次后定容。吸取提取液1ml,放入试管中,加入蒽酮试剂5ml混合,在沸水中煮沸10分钟,取出冷却,用721分光光度计在620nm处,测得光吸收值。从标准曲线中查的滤液所含糖量,然后计算出样品中含糖的百分数。以蒸馏水为对照。
2.4 数据处理
本实验的所有数据均采用Excel 2003进行整理,SPSS16.0进行方差分析,采用Duncan新复极差法进行多重比较,P<0.05。