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摘 要：植物根尖细胞有丝分裂实验是中学生物教学的一个基础实验，但是笔者在实习期间发现不同教材提供的实验方法存在一些异同，而且按照教材（人教版）中介绍的实验方法步骤去操作，成功率很低。本文结合生物学实验教学，通过改变解离液盐酸的使用浓度和解离时间、用希夫试剂代替龙胆紫或醋酸杨红溶液等技术，以大蒜根尖为试验材料，采用正交试验对实验方法进行优化，使有丝分裂实验的程序简化、时间缩短、成本降低、效果提高。其中，当解离液盐酸浓度为5mol/L，解离时间为5min，染色时间为5min时，根尖细胞有丝分裂的观察效果最好。60168
毕业论文关键词：有丝分裂，解离，染色，优化
Abstract：The plant tip cell mitosis experiment is a basic experiment in middle normal school teaching. But I found that there are some similarities and differences between different teaching materials in the experimental methods. And if in accordance with the teaching material(PEP) experimental method step introduced to operate the experiment, the success rate is very low. In this paper, combined with biology experiment teaching. By changing the concentration of hydrochloric acid and the dissociation time, using Schiff's reagent instead of gentian violet or acetic acid magenta, taking the garlic root tip as experimental materials and optimizing the experimental methods with orthogonal experimental. It can simplify the programs, shorten the time, reduce the cost and raise the effect in this mitosis experiment. And when the concertration of hydrochloric is 5mol/L, the dissociation time is 5min and the dyeing time is 5min. We will get the best effect of the plant tip cell mitosis observed.
Key words：mitosis, dissociate, dye, optimization
1 前言 4
1.1 中学实验教学中细胞有丝分裂实验的现状 4
1.2 细胞观察 4
1.2.1 根尖解离方法 4
1.2.2 染色方法 5
2 材料与方法 6
2.1 材料、试剂与仪器 6
2.2 试验方法 6
2.2.1 大蒜根尖细胞玻片的制作 6
2.2.2 预实验 6
2.2.3 正交试验设计 7
3 结果与分析 8
结论 10
参考文献 11
致谢 12
1 前言
1.1 中学实验教学中细胞有丝分裂实验的现状
新课程改革后，在教学过程中更加重视了学生的自学能力和动手能力。观察植物细胞有丝分裂实验在高中阶段是一个十分重要的实验，通过这一实验，学生能够对细胞的分裂过程形成直接的视觉效果，并且初步认识植物染色体的构成情况，这一观察实验对整个高中阶段生物科学的后续学习起到了基础作用。实验操作的过程对植物根尖制作以及有丝分裂装片的能力进行了培养，在以后的生物科学研究中，实验技能的初步培养能够为此打下坚实的基础。
1.2 细胞观察
1.2.1 根尖解离方法[1]
(1) 浓盐酸解离法
将根尖放入1mol/L盐酸中，并在60℃水浴条件下处理5~10min，当根尖变得酥软，伸长区变透明而分生区呈米黄或乳白色时解离完成。若温度条件不允许，也可在常温中进行解离，适当提高解离液的浓度或延长解离时间也能达到。2012年刘怡通过比较人教版、浙教版、上海版三版教材，并对有丝分裂实验进行了优化，得出洋葱根尖在20%的盐酸解离液中解离5min效果最好[2]。
(2) 酶解法
酶是具有高效性和专一性的催化剂。酶解法就是用酶类使细胞壁中的纤维素和果胶分解，从而达到分离细胞的目的。
酶解法采用的是2.5%果胶酶和2.5%纤维素酶的等量混合液（pH5.0-5.5），把根尖放入混合液中室温下处理3h左右。2008年陈是宇等人在试验中省略了果胶酶的使用，结合了盐酸解离法和酶解法，将材料放入20g/L纤维素酶溶液中在室温解离20min前，先用1mol/L盐酸在60℃下解离10min，不仅节省了时间和实验成本，而且染色体铺展效果良好，观察到的染色体清晰[3]。