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摘 要：Ezrin是ERM蛋白家族的成员，参与细胞骨架的组成、信号通路的传导等生理过程。本研究对Ezrin进行了原核及真核表达，在此基础上，对其磷酸化功能进行了初步研究。结果表明，Ezrin与PKM2、ACAP4之间存在明显的相互作用。荧光免疫结果显示，在西咪替丁处理条件下，Ezrin定位在细胞底膜，组胺活化壁细胞到最大刺激期时，Ezrin定位于顶膜的囊泡上。推测Ezrin的磷酸化可能受Ezrin和ACAP4、PKM2相互作用的调控，进而影响和改变细胞的动力学特性。68645
毕业论文关键词：Ezrin蛋白, PKM2, ACAP4,磷酸化
Abstract：Ezrin is a member of ERM protein family, which involved in many physiological process such as the composition of the cytoskeleton, transmission of signaling pathways. On this basis of prokaryotic expression and eukaryotic expression, the preliminarily reseach on phosphorylation of Ezrin protein in this paper. The results show that the existence of the interaction between Ezrin, PKM2 and ACAP4. The results of fluorescence immunoassay revealed that Ezrin located at the end of cell membrane. Nevertheless, Ezrin located at on the roof membrane vesicles, when the cell in the biggest stimulus period, under the activation of histamine. It is speculated that the phosphorylation of Ezrin protein was regulated by the interaction between Ezrin, PKM2 and ACAP4. And then, the interaction would influence and change the dynamic characteristic of cell.
Keywords：Ezrin, PKM2, ACAP4, phosphorylation
目 录
1 Ezrin蛋白 7
1.1 Ezrin蛋白的生物学特性 7
1.1.1 Ezrin蛋白的分布 7
1.1.2 Ezrin蛋白的结构 7
1.1.3 Ezrin蛋白的表达 7
1.2 Ezrin 蛋白的生物学功能 8
1.2.1 Ezrin蛋白与信号传导 8
1.2.2 Ezrin蛋白与细胞凋亡 9
1.2.3 Ezrin蛋白与细胞迁移 9
1.2.4 Ezrin蛋白与粘附分子 9
1.2.5 Ezrin蛋白与细胞周期 10
1.3 Ezrin蛋白与肿瘤 10
1.3.1 Ezrin蛋白与肿瘤转移相关分子 10
1.3.2 Ezrin参与肿瘤的发生与迁移 10
1.4 翻译后修饰对Ezrin功能潜在的影响 11
2. 实验材料与方法 11
2.1 主要材料 11
2.1.1 载体 11
2.1.2 质粒 11
2.1.3 细胞株与菌株 11
2.2 试剂 11
2.2.1 蛋白质相互作用相关实验试剂 11
2.2.2 细胞培养相关实验试剂 11
2.2.3 细胞处理相关实验试剂 12
2.2.4 其他相关实验材料 12
2.2.5 主要仪器 12
2.3 主要溶液 12
2.4 主要实验方法 12
2.4.1 表达载体的构建 12
2.4.2 融合蛋白的原核表达与纯化