本实验以小龙虾为实验对象,分别研究了不同饥饿时间下小龙虾的腹部肌肉中的水分、脂肪、糖类和蛋白质含量,旨在为生产上小龙虾的饲料配置提供理论支持。
2 材料来源及实验设计源:自*751`%论,文'网·www.751com.cn/
2.1小龙虾的来源
实验虾2015年2月购于淮安市淮海路水产市场,平均体重26.7±0.36g。
2.2实验设计
实验虾至实验室后暂养10d以适应实验室环境,然后开始实验。实验分为两组,分别为饥饿0d、14d,每组三个重复。实验期间禁止投饵,每天9:00捞出死虾,并移走粪便,水族箱每天换水1/5,配以24小时充气,实验期间水温保持在25±1℃。实验开始时取0d组小龙虾,用吸水纸将小龙虾体表的水分吸干,分别称取体重,人工去壳后称取肌肉重,并且记录数据,放入冷藏柜中备用,另外一组到取样时间14d时取样,方法同上。
2.3 样品测定
2.3.1 含水量测定
直接干燥法,将每组小龙虾肌肉(湿样)置于80℃干燥恒温箱中烘至恒重之后取出,计算含水量。将干燥后的肌肉密封在对应编号的小密封袋中备用。
2.3.2 总脂的测定
总脂的抽提采用Folch法[4],抽提液为氯仿和甲醇溶液(V:V=2:1),然后通过过滤去除蛋白质等滤渣,添加MgCl2溶液除去甲醇,脂类混合液在真空条件下蒸发去除氯仿溶剂,试管中最后便得到脂类[5]。
2.3.3 蛋白质的测定
小龙虾肌肉中粗蛋白质的测定采用微量凯氏定氮法,小龙虾肌肉(干样)与硫酸和催化剂(硫酸钾与硫酸铜的质量比为9:1)一同加热消化,使蛋白质分解,待消化液变成淡蓝色液体时即告消化完成。待消化液冷却至室温后,将消化液通过全自动凯氏定氮仪测得蛋白质含量[6-7]。文献综述
2.3.4 总糖的测定
采用苯酚-硫酸法测定总糖[8]。苯酚-硫酸法是利用多糖在硫酸的作用下先水解成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚生成橙黄色化合物,再以比色法测定[9-10]。首先制作出葡萄糖标准曲线[9],得回归方程为y=0.0501x-0.0034,R2=0.997。在“制作标准曲线”项下用UV757CRT分光光度计测定样品液的吸光度,对照标准曲线换算成糖的质量并计算含糖量。
3 计算与数据分析
用EXCEL记录数据并进行处理,所有数据均采用平均值±标准差(means±SD)表示,采用One-Way ANOVA(Duncan)对数据进行分析,取P<0.05为差异显著水平。