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摘要 由于我国是人口大国，确保粮食安全就变得十分重要。转基因技术已经成为各国争相开发的战略资源，因此转基因技术成为现代生物技术的核心。本实验以水稻为例，使用定性及定量PCR技术对样品进行定性及定量检测分析，可以有效的检测出水稻中是否外源基因。65050
关键词 水稻 转基因 定性检测 定量检测
Abstract: Because our country populous, ensure food security becomes very important. Transgenic technology has become more strategic resource of the development of the race, so it is the core of modern biotechnology to gm technology. This experiment from rice, for example, used fluorescence PCR technique to qualitative and quantitative detection of samples, to effectively detect the exogenous genes in rice. Used of fluorescent PCR technology, can quickly and accurately to establish rice transgenic detection system.
Keywords: Rice; Transgenic; Qualitative PCR; Quantitative PCR
目录
1 前言 4
2 材料与方法 5
2.1 材料 5
2.2 试剂与耗材 5
2.3 仪器设备 5
2.4 方法 5
2.4.1 DNA 的提取与纯化 5
2.4.2 引物序列 6
2.4.3 PCR检测 6
3 结果分析 7
3.1 定性PCR 7
3.2 实时荧光定量PCR 8
结 论 10
参考文献 11
致 谢 12
1 前言
转基因是指利用分子生物学手段将某些生物的基因转移到其他生物物种上，使其出现原物种不具有的性状或产物[1]。英国的普庇泰教授最早提出转基因食品安全问题。1998年他在研究中发现，幼鼠使用转基因土豆后，会使得内脏和免疫系统受损，这引起了科学界的极大关注[2]。论文网
实际上，在自然选择过程中，基因重组现象一直在持续，人类今天种植的普通谷物也是自然选择的结果。我们在使用这些谷物的同时，就摄入了这种谷物的野生近缘物种的抗病基因，这往往被大家忽视[3]。在传统的杂交育种过程中，会有成千上万的新基因被引进，这些基因中的大多数是人类目前为止还没有了解到的，也没有意识到这些基因的引进为带来怎样的后果。而转基因技术是在已经普遍种植的作物中，通过加入一两种已知的新基因，来改变原有的基因状态，但是，转基因产品基因组的改变对人类和环境依然存在不确定因素和潜在风险，许多国家都制订了严格地转基因生物管理法规[4]。
Bar基因来源于吸水链霉菌，该基因编码草丁膦乙酰转移酶（PAT），这种基因对除草剂具有拮抗作用，如果将该基因转移到水稻种，转入该基因的转基因水稻通过该基因的表达具有耐除草剂的特性[5,6]。水稻是世界范围内的一种主要的粮食作物，但是在水稻种植过程中，很容易有杂草生长而影响水稻的长势，目前，控制杂草的方法主要有轮作和灌溉相结合的办法，近年来，通过使用除草剂去除杂草是美国的一种新型除草方法。美国公司研发的水稻品系LLRICE06和LLRICE62，通过使用基因工程技术使外源基因bar在水稻中表达，从而获得耐受草铵磷（草丁膦类除草剂的活性成分）的转基因水稻[7]，目前该水稻品系已在6个国家获得了种植、食用、饲用等不同方面的批准。文献综述