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摘要：转基因作物潜在的安全性问题引起了人们的广泛关注，各国相继出台了相关的转基因标识管理法规，因此，作为转基因产品安全检测的研究显得尤为重要。本文通过使用常用的水稻外源基因Cry1Ab/c对待测样品进行定性和定量检测，从而对待测样品是否含有该外源基因进行定性及定量分析。65053
关键词：水稻；外源基因Cry1Ab/c；定性PCR；定量PCR
Abstract: The safety problem of transgenic crop potential has aroused widespread concern, countries have introduced transgenic labeling management regulations, so as to study related, safety detection of genetically modified products is very important. In this paper, by using the rice exogenous gene of Cry1Ab/c commonly used for qualitative and quantitative detection of sample to be measured, and thus the sample to be measured is the presence of the exogenous gene of qualitative and quantitative analysis.
Key word: Rice; Cry1Ab/c gene; qualitative PCR; quantitative PCR
目 录
1 前言 5
2 材料与方法 6
2.1 材料 6
2.2试剂与耗材 6
2.3 仪器与设备 6
2.4 方法 6
2.4.1 DNA的提取与纯化 7
2.4.2 引物序列 7
2.4.3 PCR 检测 7
3 结果分析 8
3.1定性PCR检测 9
3.2 实时荧光定量PCR检测 9
结论 10
参考文献 12
致谢 13
1 前言
自1994年首例转基因番茄被批准商业化生产以来，转基因技术获得了迅猛发展，越来越多的外源基因被导入到植株中，形成转基因植物，与此同时，转基因作物也在不同国家和地区被批准商业化种植[1]，目前种植的主要转基因作物分别为转基因大豆、转基因棉花、转基因玉米和转基因油菜。论文网
目前有许多抗病、抗虫、耐除草剂的转基因水稻研发成功，但是，由于水稻是主要的粮食作物，而转基因水稻在生物安全性方面存在不确定因素，因此，关于转基因水稻的商业化各国的态度都非常谨慎，现在已经商业化的转基因水稻很少。在这种背景下， 我国转基因水稻也得到了迅速发展，2009年，我国农业部颁发了转基因抗虫水稻华恢1号和转Cry1Ab/Cry1Ac基因抗虫水稻Bt汕优63在湖北省生产应用的安全证书[2]。
由于水稻的主要害虫为鳞翅目昆虫，而Cry1A(b)基因对于鳞翅目昆虫具有很强的抗性，因此，Cry1A(b)基因是目前研究最多的一种Bt基因类型。Cry1A(b)基因可以抗8种鳞翅目害虫，其中包括4种螟蛾科害虫、2种夜蛾科害虫、1种眼蝶科害虫和1种弄蝶科害虫[3]。该基因能有效提高了杀虫蛋白在转基因烟草和番茄等植株中的Bt表达量；修饰后的基因在转基因植株中的表达量比原始基因的表达量高10倍，全人工合成的基因在转化植株中的表达量比原始基因的表达量高100倍，我国目前将转Cry1Ab/c基因主要运用于抗虫水稻的研究[4,5]。文献综述
本研究以水稻品系为试验材料，采用定性及定量PCR方法检测待测水稻样品中是否含有Cry1Ab/c外源转基因成分，判断该水稻是否为转基因产品。