2.7南瓜叶的研究进展
南瓜叶中蛋白质含量比较丰富。据黄威等[21]的研究发现,南瓜叶中粗蛋白含量达到全叶干重的35.68%,高于全牛奶粉、蚕豆中的蛋白质的含量,并与大豆蛋白质相近,高于现在广泛用于生产叶蛋白制品的紫花苜蓿叶,是一种值得开发的优质植物蛋白。
南瓜叶中β-胡萝卜素含量较高,达到98.9 mg/100g,是胡萝卜中含量的7倍。它可以保护人体免受单氧和自由基带来的损伤,具有抗过氧化自由基的作用。此外南瓜叶中还含有维生素C,也是一种重要的抗氧化维生素[22]。马爱国[23]在研究抗氧化营养对DNA 氧化损伤保护作用时,发现如果连续服用β-胡萝卜素、维生素E和维生素C,可以显著降低由过氧化氢诱发的DNA的损伤。
3 实验原理
3.1 硅胶柱层析的原理
硅胶柱层析的分离原理是根据物质在硅胶上吸附力的不同而分离, 一般情况下极性大的物质易被硅胶吸附,该物质在硅胶的表面保留时间比较长,被洗脱出来所用的时间就较长;极性较弱的物质不易被硅胶吸附,在硅胶的表面保留的时间就比较短,较快被洗脱出来。根据吸附力的大小从而使得不同物质的混合物由于在通过硅胶的过程中因保留时间的差别而得到分离。
硅胶柱层析流动相常用系统:极性小的一般用石油醚/乙酸乙酯系统;极性较大的用二氯甲烷/甲醇系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统。不同系统中安极性较大溶液所占比例大小决定整个系统极性的大小。
3.2 薄层层析的原理
薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板)上形成薄层,然后用相应的溶剂进行展开。一般在实验中应用较多的是薄层吸附层析。
其基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或者溶解性能,即分配方式的不同,或者其他亲和作用的差异,由于混合物中的各种物质在溶液中的溶解度的不同,以及吸附剂对它们的吸附能力的不同,最终将混合物分离开来,形成一系列的斑点。
4 材料,药品与仪器
4.1 实验材料
实验材料采集于师范学院生物科技园,经作者辨认鉴定后再经指导老师赵利琴老师辨认鉴定确认为南瓜的藤。
4.2试剂与药品来!自~751论-文|网www.751com.cn
洗脱剂:石油醚与丙酮按10:1,5:1,1:1的比例配置
展开剂:二氯甲烷与甲醇10:1
显色剂:硫酸香草醛、硫酸乙醇
薄层用硅胶GF254,
柱层析用硅胶100目~200目
4.3 实验仪器
电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司
微型植物试样粉碎机 河北省黄骅市齐家务科学仪器厂
数显恒温水浴锅 国华电器有限公司
循环水式真空泵 巩义市英峪予华仪器厂
旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂
UV-3紫外检测仪 上海康禾光电仪器有限公司
手提式紫外分析仪 上海嘉鹏有限公司
DW调温电热器 上海平环燃烧设备工程技术有限公司
分样筛 钱上明萌纱筛厂
5 实验步骤
5.1成分提取
5.1.1植物材料处理
将南瓜藤放入电热恒温鼓风干燥箱中,在65℃的条件下干燥,干燥后用粉碎机将其粉碎,研末,用60目分样筛将其筛选后的粉末收集备用。得干燥南瓜藤9kg,其中南瓜叶3kg,南瓜茎6kg。